货号: | M-01750 |
适应物种: | Human |
应用: | 科研实验 |
检测方法: | 酶联免疫 |
供应商: | MY |
数量: | 现货 |
规格: | 96T/48T |
★★★★★ ★★★★★ 上海酶研生物 ★★★★★ ★★★★★
ELISA 生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
实验原理:上海酶研生物试剂盒检测方法有:双抗体夹心法、间接法、竞争法
人细胞因子信号转导抑制因子1 (SOCS-1)
试剂盒组成:
规格 | 96T | 规格 | 48T | |
试剂盒组成 | 试剂盒组成 | |||
30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 20倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | |
酶标包被板 | 12孔×8条 | 酶标包被板 | 12孔×4条 | |
酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 酶标试剂 | 3ml×1瓶 | |
样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 样品稀释液 | 3ml×1瓶 | |
显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 显色剂A液 | 3ml×1瓶 | |
显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 显色剂B液 | 3ml×1/瓶 | |
终止液 | 6ml×1瓶 | 终止液 | 3ml×1瓶 | |
标准品 | 0.5ml×1瓶 | 标准品 | 0.5ml×1瓶 | |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | |
说明书 | 1份 | 说明书 | 1份 | |
封板膜 | 2片(96) | 封板膜 | 2片(48) | |
密封袋 | 1个 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2.血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
3.尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人细胞因子信号转导抑制因子1 (SOCS-1)
操作步骤
- 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。以2000pg/ml为例:
2000pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
1000pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
500pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
250pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
125pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
- 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
- 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
- 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
- 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
- 温育:操作同3。
- 洗涤:操作同5。
- 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
- 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
- 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人细胞因子信号转导抑制因子1 (SOCS-1)
操作程序总结:
人细胞因子信号转导抑制因子1 (SOCS-1)
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人细胞因子信号转导抑制因子1 (SOCS-1)
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
- 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
- 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
人细胞因子信号转导抑制因子1 (SOCS-1)
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
本说明书48T同样适用
上海酶研生物ELISA试剂盒特点体现:
一、高效、灵敏、特异---采用全进口材料和抗体
二、稳定的重复性和可靠性---领先的科技水平
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体---严格的生产流程和规范操作
酶研生物ELISA试剂盒适用范围:
一.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
二.可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等
三.可检测指标齐全:白介素,干扰素,血管紧张素,肺炎衣原体,趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、炎症因子、血管生成素 等等 指标
酶研生物ELISA试剂盒免费代测服务:
1.每个指标需提供100微升样品,如做复孔则200微升
2、标本离心处理后请使用泡沫箱加冰袋邮寄至我司;
2、样本在一周内使用,保存条件2-8度;
3、代测服务只反馈实验结果原数据信息,不再提供相应试剂盒;
4、需支付相应试剂盒费用,代测不产生任何费用;
上海酶研生物科技有限公司于上海闵行高科技园区,拥有来自人、小鼠、大鼠、兔、猪等种属的试剂盒5000余种,代理销售TSZ、R&D 、IBL等品牌试剂盒。还可根据客户要求定做试剂盒,提供免费代测服务。质量好,使我们拥有源源不断的客户;价格低,薄利多销是我们生存的优势;服务好,让我们在业界拥有很好的口碑。我们将一如既往坚持质量第一,诚信为本的理念。感谢新老客户的青睐!!
★★★★★ 上海酶研生物科技有限公司郑重承诺★★★★★
凡购买本公司试剂盒有非人为质量问题,收货后十五个工作日内包退换