货号: | Y-02626 |
运输方式: | 干冰 |
生长状态: | 贴壁生长 |
数量: | 5×105 |
供应商: | ATCC |
规格: | T25 |
预防细胞污染的注意事项 (酶研生物)发布
1. 实验进行前,超净台用紫外灯照射30~60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风机运转20min左右再开始实验操作。
2. 实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。
3. 每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。
4. 操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。
5. CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1~2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2~3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,最后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。
6. 定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
培养基在使用过程中应注意的问题 (酶研生物)发布
(1). 培养基在使用前需37 oC预热或在室温平衡后再使用。
(2). 细胞培养过程中,吸取过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,防止残留在吸管内的培养基焦化,将有害物质带入培养液中。
(3). 尽量缩短各种液体、细胞的暴露时间。
(4). 避免液体间、细胞间的交叉污染。
(5).配制完全培养基时,配制的量最好在2周内用完为好。
- 配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100mL,用滤纸过滤,4℃保存。使用时用PBS稀释至0.4%
- 胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释(106 cells/mL)。
- 取少量细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合,轻轻吹打混匀,染色2~3min。
- 显微镜下观察,死细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞保持正常形态,无色透明有光泽。若需计算活细胞率则将染色的细胞悬液滴入细胞计数板计数。
注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数的准确性。
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★★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC.细胞都是经过严格质量控制。
冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。
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