货号: | NCI-H322 |
生长状态: | 良好 |
年限: | 永久 |
运输方式: | 常温/快递 |
器官来源: | 见名称 |
细胞形态: | 贴壁生长 |
免疫类型: | 文献 |
物种来源: | 89%DMEM/F12+10%FBS+1%双抗 |
相关疾病: | 咨询客服 |
组织来源: | Human |
品系: | ATCC |
细胞类型: | 上皮样 |
数量: | 1X10^6 cells |
规格: | T25 |
26、关于反复冻融法裂解细胞的问题:
问:用反复冻融法裂解的细胞,是贴壁的还是消化下来的细胞?很多资料上都写着-20度/37度反复冻融三次,但看到过一位生命经纬荣誉版主发的帖子说-80度/37度冻融一次就可以了,请问两者裂解效果有无区别哪,哪种更优?
答:冻融裂解细胞是为了得到检测需要的蛋白,细胞是否贴壁都可以这么做,我们采用的是液氮反复冻融三次,要求速冻速解,减少对蛋白活性的损伤。
27、2.2.15细胞的相关问题:
问:以前听说2.2.15细胞生长都比较缓慢,而且细胞成团,但是我们实验室的2.2.15细胞生长速度特别快,二传一基本一天就能长满,细胞不成团,类似HepG2细胞生长形态,不知道这样的情况是否正常?
答:我觉得第一种情况更像2.2.15细胞。我们实验室的2.2.15细胞也是细胞成团,生长慢,且不好养。建议通过RT-PCR,ELISA检测HBV几个重要基因的表达以确定你们实验室的细胞是否是真的2.2.15细胞。
28、关于cck-8的使用问题:
问:在使用cck-8检测细胞生长抑制率的时候,加完药了,在加入cck-8检查之前需不需要,换一下细胞培养液,再加cck-8?
答:如果你的药物不与cck-8试剂反应就不需要换,氧化性药物可能会有一定影响。
29、不同结肠癌细胞株之间的区问题:
问:请教不同结肠癌细胞株有何不同?各有什么特性?可以从什么书籍或资料能找到答案?
答:WiDr:Disease:colorectal adenocarcinoma Antigen Expression:HLA A24,A32,B15,B18.
COLO 320DM:Disease:colorectal adenocarcinoma Comments:The line is negative for CEA, CSAp and colon antigen 3.The cells are weakly positive for keratins and vimentin.
COLO 320HSR[COLO 320 HSR]:Disease:colorectal adenocarcinoma Comments:CEA,negative.CSAp, negative.Colon antigen 3,positive.The cells are weakly positive for keratins and vimentin.
更多请查看ATCC搜索后的网址,共有近20余种结肠癌细胞株及相关特性描述。
30、问:我想TUNEL法检测细胞凋亡,哪个公司的产品比较好?
答:当然是进口的好,但如果你做动物的话国产的比较便宜合算。
31、概念性问题:
问:请教一下概念性的问题:胃黏膜上皮细胞、胃上皮细胞、上皮细胞之间的包含关系?或者其中两者是等同的?
答:全部胃粘膜表面(包括胃小凹表面)均覆以单层柱状上皮。上皮细胞能分泌粘液,可在粘膜表面形成粘液-碳酸氢盐屏障(后述)与胃粘膜屏障(后述)共同起重要保护作用。这里得胃黏膜上皮细胞和胃上皮细胞其实是等同的;上皮细胞的概念就大了。
32、小鼠脾T细胞的培养问题:
问:(1)正在进行小鼠脾T淋巴细胞培养,发现长得很慢,想问:用哪种进口胎牛血清要好一些?我用了CD3、CD28抗体,IL-2用多少单位比较好?
答:小鼠脾T淋巴细胞是终末分化细胞长的当然很慢,血清的话用进口的和国外的都可以。但要先实验,有些进口血清对T淋巴细胞增殖有影响。CD3、CD28抗体用5-10µg/ml的量包被96孔板然后作用。IL-2浓度为10-30ng/ml,不同公司的产品不同,要摸索一下条件,最好找一篇文章,然后跟它买一样的产品,来做。
问:(2)我培养的是调节T细胞。回答中“有些进口血清对T淋巴细胞增殖有影响”是指什么?你说IL-2浓度为10-30ng/ml,是根据你的经验,还是文献记载?我查了很多文献,有用人的IL-2,有用鼠的IL-2,用鼠IL-2的浓度差别太大,从2ng至30ng都有。我用的是peprotech公司的。
答:某些进口血清或是某些产品的某些批次会对T淋巴细胞增殖有影响,可能出现不增殖的结果,有些淋巴细胞细胞在里面长不好,甚至死亡。血清成分太复杂,原因不好说。整个实验最好使用同一批血清,在用前,先预实验(可以用丝裂原做非未处理的细胞)确定没问题,再用。国产血清也是一样。剂量方面我做的主要是PBMC或是脾细胞,没有进一步分选,不加IL-2。上面的主要是从文献上看的。
更多相关技术问题请联系@我!!
上海名劲生物科技有限公司 | 公司账户:上海名劲生物科技有限公司 |
联系人:刘鹏13764978708 | 开户银行:招商银行上海闵行支行 |
企业QQ:1463049905 | 账号:121918863910601 |
订购邮箱:Sh@mjswkj.cn | 社会信用代码:91310120MA1HK7KBXU |
网址:www.mjswkj.cn | 执照证件编号:26000000201512040070 |