货号: | MIMCL-017 |
数量: | 100万 |
规格: | 1ml/T25 |
货号:MIMCL-017
细胞介绍
该细胞来源于C57BL/6-TL+小鼠的脾细胞,为T淋巴细胞,可以产生IL-3, T细胞生长因子2(TCGF2), 肥大细胞生长因子2(MCGF2)和B细胞生长因子1(BSF-1)。
细胞特性
1) 来源:小鼠淋巴
2) 形态:淋巴母细胞样,悬浮生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加4.5g/L 葡萄糖+1mM丙酮酸钠+100u/ml IL-2),90%;优质胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
赛百慷(上海)生物技术股份有限公司主要产品和技术服务:
一、原代细胞服务
各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源;
多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源;
原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等;
原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务;
二、细胞株/系服务
细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书;
细胞系培养过程的技术指导;
细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等;
三、iPS细胞
iPS细胞基础培养(有滋养层or无滋养层在);
iPS细胞增殖及冷冻保存;
iPS基础培养技术实习;
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四、技术外包服务:各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等
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