货号: | KL-D6217 |
供应商: | 康朗生物 |
数量: | 大量 |
英文名: | T4 DNA Ligase |
保质期: | 长期 |
保存条件: | -20℃ |
规格: | 40000U|200000U |
T4 DNA连接酶
英文名:T4 DNA Ligase规格:40000U|200000U
本酶可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
用途:T4 DNA Ligase常用于DNA*(代"片")段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共200单位。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10×Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。