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趋化因子ENA-78（ENA-78）ELISA试剂盒
大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA Kit
Anti-Mouse Ly-108 Biotin 100 ug
通过金山区市场监管局认证 
喹啉-6-乙酸甲酯| 货号： | YH0852 |
| 样本： | 细胞上清液，血浆，组织均浆，血清等 |
| 标记物： | HRP/生物素 |
| 适应物种： | 人 |
| 应用： | 科研研究用 |
| 检测方法： | ELISA |
| 检测限： | 详看说明书 |
| 供应商： | 上海依赫生物 |
| 数量： | 长期供应 |
| 规格： | 48T/96T |
试剂盒组成：
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片（48） 2片（96）
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存
①上海依赫生物：专业生产ELISA试剂盒8年，是一家主要以批发，零售为主的专业公司，我们可以做到产品质量优，价格低。
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试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中蓝耳病（PRRS)水平。
实验原理：
本试剂盒采用双抗体夹心法测定血清或血浆中猪蓝耳病（PRRS)。用纯化的猪蓝耳病（PRRS)抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中蓝耳病（PRRS)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的蓝耳病（PRRS)抗体结合，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪蓝耳病（PRRS)的存在与否。
样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照（标准品）100μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液50μl，然后再加待测样品50μl。轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至1000ml后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl(或一滴)，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A 50μl(或一滴)，再加入显色剂B 50μl(或一滴)，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟
10.终止：每孔加终止液50μl(或一滴)，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.10（阴性对照平均值低于0.05按0.05计算）
阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为蓝耳病（PRRS)阴性
阳性判定：样品OD值≥ 临界值（CUT OFF）者为蓝耳病（PRRS)阳性
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
温馨提示：不可用于临床治疗。
