货号: | ZDK-0009Z |
保存条件: | 2-8℃ |
数量: | 大量 |
保质期: | 1年 |
产品编号:ZDK-009Z 规格:4ml
该产品由军事医学科学院研发监制
一、 原理
含有谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白质或多肽可以与谷胱甘肽-琼脂糖凝胶结合,用适当的缓冲液冲洗去除杂蛋白后,再用还原型谷胱甘肽洗脱回收含有谷胱甘肽S-转移酶(GS T)的融合蛋白质或多肽。
二、 试剂盒组成
A. 层析柱 1根
B. 谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B 4ml
C. 还原型谷胱甘肽 1g
三、 纯化方法
1.取2ml谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B装柱,凝胶自然沉降。
2.用5-10倍柱床体积的水洗层析柱,再用5倍柱床体积的结合缓冲液(20mmol/L磷酸盐缓冲液,200mmol/L NaCl,pH 7.8)平衡层析凝胶柱。
3. 将适量细胞裂解液(20mmol/L磷酸盐缓冲液,200mmol/L NaCl,pH 7.8)12000g离心,取上清,上样,流速为0.1ml/min。
4.用5-10倍柱床体积的结合缓冲液洗层析柱,流速0.1ml/min。
5.分别用含不同浓度的还原型谷胱甘肽洗脱缓冲液(50mmol/L Tris.HCl,pH8.0, 5mmol/L 还原型谷胱甘肽)进行洗脱,流速0.1ml/min,收集各洗脱峰。(还原型谷胱甘肽的浓度可以依据不同的融合蛋白进行调整)。
6.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析融合蛋白纯度。
四、 保存
2-8℃下保存一年。
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