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GST标签蛋白纯化介质

产品价格: ¥650.00

最小起订量:暂无 可售数量:999盒

发货时限:
暂无
所在地区:
中国北京
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-31 01:30:04
浏览次数:
65

产品详情

品牌名称:
NERCB
货号: IPE-GST
数量: 大量
规格: 0.1mg

 

琼脂糖亲和介质(谷胱甘肽)产品说明书
1. 产品简介
琼脂糖亲和介质(谷胱甘肽)是专门设计用于分离纯化不同来源(如胎盘、肝脏、胞液、大片吸虫、昆虫、血吸虫、玉米螟等)的谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽S-转移酶的重组融合蛋白和依赖S-转移酶或谷胱甘肽的蛋白,一步分离即可得到高纯度的目标蛋白,操作条件温和,有利于保持蛋白活性。
本中心开发的谷胱甘肽亲和介质以琼脂糖凝胶为基质,以谷胱甘肽为配基,具有好的色谱性能,并具有较强的化学和物理稳定性。
2. 产品特性
参数
指标
基质
4%交联琼脂糖凝胶
配基
谷胱甘肽
形状
球形
介质平均粒径
90 μm (45~165)
配基密度
20~30 GSH/ml wet gel
动态载量
10mg GST/ml wet gel
最高流速(25
450 cm/h
最高耐压
0.3 MPa (3 bar)
pH稳定性
3~12(长时间);2~12(短时间)
化学稳定性
30%异丙醇、6M盐酸胍、8M尿素
物理稳定性
溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2%
保存
4~8 oC20%乙醇)
3. 应用
谷胱甘肽亲和介质的层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡:5~10CV的平衡缓冲液(50 mM Tris-HClpH8.0,可添加适当浓度(如0.15M)的NaCl抑制非特异性吸附)平衡层析柱,至流出液电导和pH不变(与平衡液一致)。
进料:样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制;低浓度样品溶液可用平衡液透析;高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱,样品应经离心或微滤(0.45μm)处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗:上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱:用洗脱缓冲液(50 mM Tris-HCl+10mM GSHpH8.0GSH浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整)洗脱,收集流出液。
原位清洗:介质使用数次(具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关)后,需要对介质进行在位清洗。
1)最常用的方法是用0.5MNaOH100cm/h的速度淋洗柱子3-5CV,然后用缓冲液洗到中性即可重复使用;
2)对疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质,可用5~10 CV70%乙醇或30%异丙醇清洗(20 min以上),并用3~10 CV的纯水冲洗。
其它注意事项:在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干而导致气泡进入。

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