货号: | JLEM002 |
数量: | 1ml |
保质期: | 2年 |
保存条件: | -20℃ |
规格: | 1ml/100ml/1000ml/5L |
包装:2×Pfu PCR预混液 1ml;
保存条件: -20℃保存12个月。( 请勿保存于-70℃,防止反复冻融导致酶活降低)
产品说明:2X Pfu Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTP混合物、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时,仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污染(加样次数减少)。同时,由于体系内含有优化剂与增强剂,能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有平末端。Pfu DNA聚合酶是极端嗜热性细菌Pyrococcus furiosus来源的高度热稳定DNA聚合酶,分子量为90 KD。其保真性是普通Taq DNA聚合酶的10倍左右。扩增片段的长度可达2 kb(简单模板)。延伸速度为0.5-1 kb/ min(70-75℃)。该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性。
产品特点:使用方便:仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。快速、高效:减少加样步骤,节约时间。可重复:降低污染和加样错误风险。
产品用途:高保真PCR扩增
高通量、高重复性高保真PCR扩增
高重复性高保真PCR扩增
制备基因克隆或蛋白表达用的PCR产物
位点特异性突变
2×PCR Pfu Mix的组分
100 mM KCl
200 mM Tris-Cl
20 mM MgSO4
100 mM (NH4)2SO4
400 uM dNTP混合物
0.1 U/μl Pfu DNA聚合酶及稳定剂增强剂等
应用举例
注:以下反应举例为50 μl标准PCR体系,仅供参考。
λ DNA(2.5 ng/μl) 1 μl
Primer 1(10 μM ) 2 μl
Primer 2(10 μM) 2 μl
2×Pfu PCR Mix 25 μl
dd H2O 补足至50 μl
反应条件
95℃ 3 min
95℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 30 Cycles
72℃ 2~8 min
72℃ 7 min