货号: | BMPCR |
供应商: | 无锡百迈格生物科技有限公司 |
数量: | 现货 |
保质期: | 一年 |
保存条件: | 室温 |
规格: | 5ml 50ml |
试剂盒组成
产品编号 | 规格 | 价格 |
BMPCR-5 | 5 mL | 元 |
BMPCR-50 | 50 mL | 元 |
试剂盒储存条件及稳定性
试剂盒内组分室温保存即可,在适合的储存条件下该试剂盒未开封使用有效期为1年。
产品简介
该试剂盒采用磁珠纯化方式,适合于从各种PCR产物或酶促反应液中高通量快速地回收100 bp~50 kb的DNA的片段,回收效率高达80%。能有效地去除PCR产物或酶促反应液中的寡聚核甘酸、引物二聚体、盐、蛋白质等污染。该系统操作简单,可以同绝大多数的核酸纯化仪相配合使用,整个操作流程可完全被自动化。转移PCR产物或酶促反应液至96孔板中,加入结合液/磁珠混合液,核酸被吸附到磁珠的表面,经磁场作用下分离,吸弃溶液去除杂质,经一步快速洗涤后,最后用灭菌水或者Elution Buffer洗脱出DNA即可,回收的DNA可直接用于酶切、测序、杂交、PCR反应等后续操作。
产品优势
1. 适合DNA的片段范围广:100 bp~50 kb;
2. 回收率高:回收率高达80%以上;
3. DNA纯度高:回收的PCR产物纯度高;
4. 操作快速简单:20 min即可完成整个操作流程,无需离心;
5. 可适用于自动化、高通量PCR产物纯化。
磁珠参数
PCR产物纯化专用超顺磁磁珠,此款磁珠可在无锡百迈格生物科技有限公司购买(货号:BMS1000-2)。
操作步骤
自备试剂:
洗涤液:85% 乙醇;
洗脱液:Buffer EB(10 mM Tris-HCl,pH 8.0)或去离子水(pH在7.0~8.0之间)。
1. 充分混合震荡磁珠,使管内磁珠完全均匀悬浮起来。
2. 向样品管(可使用300 μL PCR管或96孔板)中加入待纯化的DNA样品溶液。
3. 取2.0×样品体积的磁珠溶液加入样品管中,漩涡震荡5秒后,室温静止结合5 min。
注:放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀,以保证磁珠处于悬浮状态。
4. 将样品管置于磁力架上2min左右或待磁珠被磁力架装置完全吸附,保持样品管在磁力架上静止,用移液枪吸取上清并弃掉,操作过程中避免触碰到磁珠团。
5. 保持样品管在磁力架上,向管内慢慢加入300 μL 85%乙醇,保持样品管不离开磁力架以及磁珠团始终被吸附在管壁上,禁止分散开。
6. 将样品管置于磁力架上 2min左右或待磁珠被磁力架完全吸附,保持样品管在磁力架上静止,用移液枪吸取上清并弃掉,操作过程中避免触碰到磁珠团。
7. 重复步骤5~6,将管内的液体全部吸除干净。
8. 将样品管从磁力架上取出,于室温放置3~5 min,使残留乙醇充分挥发。
注:避免真空干燥,磁珠过于干燥将会降低 DNA 洗脱效率。
9. 向管内加入20~100 μL洗脱液,并用移液枪轻轻吹打5-10次,使磁珠重悬混匀,操作过程中应避免产生气泡。
10. 室温放置5 min以充分洗脱。
注:为了提高洗脱效率,放置期间如出现磁珠沉降现象应及时颠倒或者旋窝混匀,以保证
磁珠处于悬浮状态。
11. 将洗脱样品管放回磁力架上2 min或待所有磁珠都被磁力架装置完全吸附。
12. 小心地将洗脱上清转移到新的灭过菌的管子中,在转移过程不要碰到磁珠,如出现磁珠悬起现象请重复步骤 11~12。