热门搜索： page  移液器  PCR  生物  抗体  伯乐  垂直电泳槽  bio  防脱载玻片  山东 
首页 > 商城 > 生化试剂库 > 核酸纯化 > 总RNA分离纯化
点击图片查看原图

固定组织RNA提取试剂盒

产品价格: ￥1350.00

最小起订量：暂无 可售数量：999盒

发货时限：
暂无
所在地区：
中国北京
有效期至：
长期有效
最后更新：
2021-05-24 01:30:05
浏览次数：
66
进入店铺

买家正在看

Ipilimumab Ipilimumab ￥1500.00 HYQ 柱式法BAC/PAC质粒大提试剂盒 BAC HYQ 柱式法BAC/PAC质粒大提试剂盒 BAC ￥980.00 UNlQ-10 柱式酵母质粒 DNA 抽提试剂盒 UNlQ-10 柱式酵母质粒 DNA 抽提试剂盒 ￥298.00
企业信息

该企业的其他产品

动物组织总RNA提取试 动物组织总RNA提取试880.00 miRNA提取试剂盒 miRNA提取试剂盒320.00 寡核苷酸纯化试剂盒  寡核苷酸纯化试剂盒 290.00 通用型 DNA 纯化回收 通用型 DNA 纯化回收330.00 微量琼脂糖凝胶 DNA 微量琼脂糖凝胶 DNA 290.00 超纯RNA提取试剂盒（ 超纯RNA提取试剂盒（1080.00 大量琼脂糖凝胶 DNA 大量琼脂糖凝胶 DNA 390.00 细菌细胞总RNA 提取试 细菌细胞总RNA 提取试1260.00

产品详情

品牌名称：
DORUN
货号： DY6169
供应商： 德元国际
数量： 大量
规格： 50T
固定组织RNA提取试剂盒
RNApureFFPEKit
Cat No：DY6169
                 
                 
产品组分              
    组分 Contents 　 　 50T    
    Buffer 1 # 　 　 15ml    
    Buffer 2 # 　 　 1.25ml    
    Buffer 3 # 　 　 45ml    
    Buffer 4#（concentrate） 　 11ml    
    Buffer 5 # 　 　 10ml    
    过滤柱 　 　 　 50个    
    吸附柱 　 　 　 50个    
    收集管 　 　 　 50个    
    离心管 　 　 　 50个    
                 
                 
储运条件              
    本试剂盒中Buffer 2 #保存在-20℃，其余组分保存在室温（15-25℃）干燥条件下保存。保质期一年
说    明              
   本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途。    
产品简介              
     本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总 RNA。适合从小于 30mg 的石蜡包埋组织或切片中抽提高纯度的总 RNA，本试剂盒无需使用酚/liufang抽提和异丙醇沉淀，一小时内即可完成多个样品的抽提。
   本试剂盒使用专门优化的裂解液，释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA，无需过夜操作；消化后的样品在较高的温度孵育后，去除由福尔马林交联造成的抑制作用，有效释放组织切片中的 RNA，而避免危害 RNA 的完整性；优化的缓冲系统使裂解液中的 RNA 可特异结合到硅胶吸附膜上，而其他污染物可流过膜；可通过漂洗步骤有效去除，经过洗脱的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Real-timeRT-PCR 和印迹分析等实验。
实验前准备及注意事项            
  1. 本实验需要无水乙醇、10mMPBS（PH7.4）等请自备。    
  2. 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4h，塑料器皿可在0.5MNaOH中浸
   泡10min，用水彻底冲洗后高压灭菌。
  3. 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
  4. 获得样品后，尽快将样品在4–10%的福尔马林中固定，固定时间以14–24小
   时为宜，时间过长易导致RNA断裂，影响下游实验。
  5. 第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer 4 #中加入无水乙醇。
  6. 确保包埋前的样品彻底脱水，残留的福尔马林会抑制Buffer 2 #的作用。
   Buffer 2 #勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
  7. 使用前请检查Buffer1#和Buffer3#是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或
   者沉淀，请将Buffer1#和Buffer3#于56℃水浴重新溶解。
  8. 所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。
                 
操作步骤  
  1. 样品处理
   1）石蜡包埋样本：用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉，露出组织。 
     2）福尔马林等固定液中的样本：取约20mg的样本，切成小块，置于离心管中，加入500μl10mMPBS（PH7.4）,涡旋震荡，10,000rpm（～11,200×g）离心1min，重复3次，可直接进行第7步操作。
  2. 将组织块切成5–10µm的薄片。
  注意：如果样品表面已经暴露在空气中，请将接触空气的2-3片弃掉不用。
  3. 取约1×1cm2的切片（共约4-5片切片）置于离心管（自备）中，加入1ml二甲苯，盖紧管盖，涡旋震荡10s。
  4. 12,000rpm（～13,400×g）离心2min，小心吸弃上清，注意不要吸弃沉   淀。  
  5. 加入1ml 无水乙醇，涡旋震荡混匀。12,000rpm离心2min，弃上清，注意不要吸弃沉淀。
 注意：乙醇可以除去样品中残余的二甲苯。
  6． 打开管盖，室温或最高至37°C孵育10min，直至无乙醇残留
  7． 加入150 μlBuffer1#，重悬沉淀；加入10 μlBuffer 2 #，涡旋震荡混匀。
  8． 56℃孵育15min，直至样品完全溶解。80℃孵育15min。短暂离心，使管
    壁上的溶液收集到管底。
注意：1）此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸，孵育的温度过高或时间过长
         可能造成RNA断裂，产生RNA碎片。
     2）56℃孵育完后的样品可以放在室温，直至水浴锅或干浴锅温度达到80
         ℃之后再把样品置于80℃孵育。
  9． 加入320 μlBuffer3#，涡旋震荡彻底混匀。
  10．将步骤9所得溶液全部加入到过滤柱中(过滤柱应预先放入收集管中)，
    10,000rpm离心1min，收集滤液。
  11．在步骤10得到的滤液中，加入720 μl 无水乙醇，涡旋震荡彻底混匀。
注意：加入无水乙醇后，可能有少量沉淀物析出，但不影响后续操作。
  12. 将上步所得溶液全部加入到吸附柱（吸附柱应预先装入收集管中）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rmp离心1min,倒掉收集管中的溶液，将吸附柱重新装入收集管中。
 注意：吸附柱的最大载量为100 µg不要超载，否则会影响RNA的产量和纯度。
  13.   向吸附柱中加入500 μl Buffer 4#（使用前检查是否加入无水乙醇）,
     12,000 rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。 
  14. 重复步骤13。            
  15．12,000rpm离心2min，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，彻底
    晾干。注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后
    续酶促反应（酶切、PCR等）。
  16. 将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中，向吸附柱的中间部位加入30-50
    μl Buffer 5 #，室温放置1min，12,000 rpm离心1min，收集RNA溶液，
    -70℃保存RNA，防止降解。
  注意：1）Buffer 5 #体积不应小于30 μl，体积过小影响回收率。
        2）如果要提高RNA的产量，可用30-50 μl新的Buffer 5 #重复步骤16
        3）如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸到吸附柱中，
           重复步骤16。
温馨提示：不可用于临床治疗。

免责声明

本网页所展示的有关【固定组织RNA提取试剂盒】的信息/图片/参数等由的会员【北京德元国际科技有限公司 】提供，由【生物实验采购网】会员【北京德元国际科技有限公司 】自行对信息/图片/参数等的真实性、准确性和合法性负责，本平台（本网站）仅提供展示服务，请谨慎交易，因交易而产生的法 律关系及法律纠纷由您自行协商解决，本平台（本网站）对此不承担任何责任。您在本网页可以浏览【固定组织RNA提取试剂盒】有关的信息/图片/价格等及提供 【固定组织RNA提取试剂盒】的商家公司简介、联系方式等信息。

在您的合法权益受到侵害时，请您致电，我们将竭诚为您服务，感谢您对【生物实验采购网】的关注与支持！

相关商品

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明：本站有部分内容来自互联网，如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权，请来电或致函告之，本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。