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| 货号： | IBSBIO-0010 |
| 数量： | 大量 |
cDNA克隆的构建过程
首先是逆转录酶和cDNA第一链的合成。逆转录酶是DNA或者RNA依赖的DNA聚合酶，可以利用DNA或者RNA合成DNA。cDNA的克隆主要是通过寡聚胸腺嘧啶从3’A尾巴开始合成cDNA，但这样得到的cDNA克隆中有10%~15%没有3’端的序列；6到9个核苷酸随机引物也可用于逆转录的反应中，这对于长转录本5’端的扩增很有利，但是这样的方法不能得到全长cDNA；其次是合成cDNA第二链。单链cDNA3’端的发卡结构，便于DNA聚合酶I发挥5’ 至3’聚合酶活性，合成cDNA的第二链；最后将双链cDNA克隆到质粒载体中进行扩增，最后进行测序，研究转录本的信息以及功能。
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