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shRNA克隆
FM-004-05
热点实验服务：RNA干扰整体实验服务（
ChIP 染色质免疫共沉淀服务
通过海淀分局认证 
蛋白质分离与纯化
454GS-FLX测序
Solexa测序
RACE(rapid amplifica
引物/探针设计
重组抗体制备
基因序列分析| 服务名称： | 基因表达 |
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客服电话：010-58717636 业务QQ1:807475538 业务QQ2：2625721894
服务概述
市场部邮箱：biokitmarket@163.com
原核表达目前本实验室主要采用的原核表达系统的表达载体为pET载体系列与pGEX载体系列，表达菌株为BL21(DE3)系列菌株和Rosseta系列菌株，如有特殊需要，我们还单独可以提供特殊菌株与载体。
样品要求1.目的基因序列信息，
服务流程
2.基因片段—亚克隆模板（包括：菌液、质粒、PCR扩增产物、RT-PCR扩增产物、从其他质粒上酶切得到的DNA片段等）及检测结果和背景资料；
3.待表达基因已尝试表达的方法与结果(若有)；
4.待表达基因的特殊要求（带何种标签及标签的位置）；
5.纯化方式；
6.最终表达量等。1、若客户提供的基因片段中已有合适限制性内切酶位点，则直接酶切并回收其片段；若无，则以客户提供的基因片段为模板，设计并合成含有相关限制性内切酶位点的引物，用高保真性能的DNA聚合酶扩增，然后再酶切并回收其片段。
2、构建重组载体质粒：把目的基因片段与相同酶切后的表达载体连接，转化大肠杆菌克隆菌株感受态细胞，筛选转化子，测序鉴定。
3、把重组载体质粒转化至BL21(DE3)或Rosseta系列表达菌株中，筛选转化子。
4、重组表达质粒在表达菌株中的诱导表达。
5、表达产物的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析。
6、表达产物的纯化（按照柱材说明书操作）。
7、纯化产物免疫学活性的鉴定（ELISA 或WESTERN BLOTTING检测）完成时间
1~2月
最终产品
完整实验报告；含有目的基因的表达载体质粒以及对应的菌株。纯化的目的蛋白。
服务费用
根据研究基因的国内外研究情况而定。基因背景不清晰的则询价。另外，由于某些基因的表达产物会抑制宿主菌生长，我们不保证每一个基因都能够高效表达。
服务概述酵母真核表达目前本实验室主要采用酵母表达体系的载体为pPIC9k与pPIC3.5k，表达菌株为毕赤酵母GS115与KM71，如有特殊需要，我们还单独可以提供特殊菌株与载体。
样品要求1.目的基因序列信息，
2.基因片段—亚克隆模板（包括：菌液、质粒、PCR扩增产物、RT-PCR扩增产物、从其他质粒上酶切得到的DNA片段等）及检测结果和背景资料；
3.待表达基因已尝试表达的方法与结果(若有)；
4.待表达基因的特殊要求（带何种标签及标签的位置）；
5.纯化方式；
6.最终表达量等。服务流程
1、获得含合适限制性内切酶位点的目的基因片段（参见原核表达项目下）。
2、构建重组载体质粒：把目的基因片段与相同酶切后的表达载体连接，转化大肠杆菌克隆菌株感受态细胞，筛选转化子，测序鉴定。
3、把重组载体质粒转化至BL21(DE3)或Rosseta系列表达菌株中，筛选转化子。
4、重组表达质粒在表达菌株中的诱导表达。
5、表达产物的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析。
6、表达产物的纯化（按照柱材说明书操作）。
7、纯化产物免疫学活性的鉴定（ELISA 或WESTERN BLOTTING检测）完成时间
2~4月。
最终产品
完整实验报告；含有目的基因的表达载体质粒以及对应的菌株。纯化的目的蛋白。
服务费用
根据研究基因的国内外研究情况而定。基因背景不清晰的则询价。另外，由于某些基因的表达产物会抑制宿主菌生长，我们不保证每一个基因都能够高效表达。
服务概述哺乳细胞真核表达随着愈来愈多的治疗疾病的药物蛋白质被发现，高纯度活性蛋白的获得具有更大的意义。通过各种真核表达系统生产外源蛋白是目前研究的热点领域，也是今后蛋白质工程技术一个重要的研究方向。它不仅可以表达克隆的cDNA，而且还可以表达真核基因组DNA，表达的蛋白质可以被适当地修饰(糖基化等)。我公司选用适合实验（科研项目）需要的真核表达系统和合适的表达载体为您提供优质的服务。
样品要求1.目的基因序列信息，
2.基因片段—亚克隆模板（包括：菌液、质粒、PCR扩增产物、RT-PCR扩增产物、从其他质粒上酶切得到的DNA片段等）及检测结果和背景资料；
3.待表达基因的特殊要求（带何种标签及标签的位置）；
4.纯化方式；
5.最终表达量等。服务流程
哺乳动物细胞的瞬时表达：1、获得含合适限制性内切酶位点的目的基因片段：合成基因或者客户提供(cDNA、基因组DNA、质粒等)；
2、构建表达载体；
3、瞬时转染CHO、HEK293等哺乳动物细胞；
4、Western blot检测。哺乳动物细胞的稳定表达：
1、获得含合适限制性内切酶位点的目的基因片段：合成基因或者客户提供(cDNA、基因组DNA、质粒等)；
2、构建表达载体；
3、稳定转化细胞；
4、Western blot检测；
5、筛选稳定表达细胞株。完成时间
2~4月
最终产品
完整实验报告；含有目的基因的表达载体质粒，稳定表达的细胞株。纯化的目的蛋白。
服务费用
根据研究基因的国内外研究情况而定。基因背景不清晰的则询价。另外，由于某些基因的表达产物会抑制细胞株生长，我们不保证每一个基因都能够高效表达。
