货号: | A5430L2670 |
产品说明书
产品信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 保存 |
Hoechst 33342 *超级纯* | A5430L2670 | 5 mL(20mM) | -20℃ |
产品描述
Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低,在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 系列染料因与DNA结合的特性,也常被用来进行线粒体DNA的观察。Hoechst33258和Hoechst33342是两种非常相近的Hoechst染料,他们都在紫外段350nm被激发,发射波长都为461nm,两种染料经常被用来替代另一种荧光染料DAPI. Hoechst 33342比33258具有更强的亲脂性,因此能更好的透过完整的细胞膜,在部分实验中Hoechst33258的细胞透过性存在明显不足。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33342工作终浓度为0.5-5μM,在一些敏感性实验时,最好设置多个染色浓度,以获得最佳染色效果。
技术参数
光学性质:Ex(nm):350 Em(nm):461
化学参数:分子量:561.93 溶剂:Water CAS:23491-52-3
使用方法
1.缓冲液制备。用PBS或合适的缓冲液制备10~50µM Hoechst 33342染色液。
2.固定的细胞或组织染色。对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。依次按步骤进行免疫荧光染色,和Hoechst33342染色。如果不进行免疫荧光染色,则直接按步骤进行Hoechst33342染色。
a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b)吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长461nm。
3.活细胞或组织染色
a)细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b)在37℃培养细胞10~20分钟。
c)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长461nm。
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。-20℃干燥避光保存,保质期12个月。
注意事项
1. Hoechst 33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。