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cDNA末端的快速扩增 (RACE)

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全国
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长期有效
最后更新:
2021-05-31 01:30:04
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产品详情

品牌名称:
 在通过杂交、cDNA文库构建等方法筛选到一段非全长的cDNA序列后,我们可以通过RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 实验进一步扩增此cDNA的5’ 末端或3’ 末端,从而得到全长的cDNA。 
RACE实验是获取目的基因未知序列的一种经济、有效、有针对性的方法。研究人员可通过获得的RACE序列信息进一步分析研究研究目的基因序列情况,也可继续进行后续实验操作,例如以总RNA为模板RT-PCR扩增目的基因、基因突变及修复、基因亚克隆至表达载体直至蛋白表达等。
 服务内容
◇ Total RNA提取:不同实验材料,选择不同的试剂进行RNA提取
例如,使用RNAiso Plus (Code No.: 9108)、TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (Code No.: 9767) 等试剂。并对提取的Total RNA进一步精制处理、质量验证,以确保实验结果的可靠性。
◇ 已知序列验证
根据客户提供的已知序列设计引物,RT-PCR扩增目的序列,以验证已知序列在样品中的存在情况。
◇ 3’ RACE实验根据目的基因情况,选择合适方法进行3’ RACE。
例如,使用3’ -Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase (Code No.: 6106) ,该试剂盒中独特设计的Adaptor和Nested PCR提高了PCR的特异性和灵敏度,从而轻松获得cDNA 3’ 端的序列。
◇ 5’ RACE实验:根据目的基因情况,选择合适方法进行5’ RACE。
例如,使用 5’ RACE Kit with TAP (Code No.: 6107) ,该试剂盒中的Tobacco Acid Pyrophosphatase能有效识别mRNA 5’ 末端的帽子位点,从而得到cDNA 5’ 端全长序列。
◇ RACE获得序列的验证
RACE获得序列后,将分别在已知序列和RACE获得的未知序列上设计引物进行PCR扩增,以电泳检测方式验证获取的RACE序列来源于已知序列。
 

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