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蛋白质组学
基于Label Free的定量蛋白组分析
原核表达与蛋白纯化
通过长沙市工商行政管理局认证 
专业提供生物医药实验技术服务
长沙南科生物http://www.nkbio.cn
业务经理陆勇:18229848048/14726920250
技术服务项目:病理形态学、细胞生物学、分子生物学、免疫与生化、组织与基因芯片、动物实验等.
长沙南科生物技术有限公司是一家专业提供医学、生物学实验技术服务和技术解决方案的生物科技公司，公司拥有完善的病理组织、分子生物、免疫与生化、细胞培养、病毒学、动物及裸鼠实验室，开展质粒构建、蛋白表达、抗体制作、医学及生物实验技术服务，已成功的为湘雅医学院、同济医学院、北京儿童医院、解放军301、309医院、华中农大、上海华山医院、上海瑞金医院、温州医学院、武大医学院、广东医学院、第三军医、第四军医、湖南省人医、湖南省肿瘤医院、湖南农大、湖南中医大、湖北中医大等单位提供了优质的实验技术服务以及相关产品和试剂。
南科生物面对医学院及其附属医院、医药科研院所、设有生物专业高校提供单项和整体课题实验技术服务，对于握有科研课题但工作繁忙而无暇分身的临床医生而言，只需要您将课题交付我们，剩下的工作由南科生物完成，我们可以为您节约大量宝贵的时间和精力；对于面临毕业压力的广大硕博士而言，我们乐于一起探讨课题方案的合理性并给出建议，最大程度上优化实验方案和节约资金；对于课题也许您还只有一个设想，南科生物只需要您的课题设想或目标，我们愿意和您一起讨论并确定合理的课题方案并付诸实施，直至论文交付和顺利毕业。
南科生物所追求的目标不仅仅是科研课题实施的过程，更多的时候我们关注实施前后的各个环节，客户满意将是南科生物最大动力。
南科生物力求建立诚信、优质、高效的服务形象，并以此确定南科在医学、生物学实验技术外包领域的领先地位。
南科生物提供组织蜡块包埋、组织切片、HE染色、病理特殊染色、细胞培养、细胞爬片、免疫组织化学IHC，免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦照相、细胞凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验材料提供（组织、细胞、抗体等）、课题设计与实验操作、图片采集与结果评价等方面的技术服务。 南科生物多年以来已建立一批人体各器官正常组织、肿瘤组织与肿瘤旁旁组织的蜡块库和一批常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用。客户可选择由南科生物提供实验材料或者自己提供材料，我们负责完成组织包埋处理、石蜡切片、细胞培养、细胞爬片、染色、图片采集、数据测定等全套技术服务。抗氧化/自由基检测
本检测指标包括总谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽 (GSSG)、活性氧ROS、丙二醛MDA、TAC总抗氧化能力、超氧化物歧化酶SOD、CuZn+Mn-SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)、过氧化氢H2O2、过氧化氢酶等检测。
谷胱甘肽 (GSSG+ GSH)检测基本原理：通过谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH)，而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系，前后两个反应合并起来后，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素，总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A412就可以计算出总谷胱甘肽的量。还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源，对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重要作用，并且是动物细胞中关键的抗氧化剂，总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。
活性氧ROS利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧的检测。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF，检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。
丙二醛MDA (Malondialdehyde)是一种生物体脂质氧化的天然产物。动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。通过比色法对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA进行定量检测，血浆、血清样品中的MDA含量通常在约2-4µM，尿液中的MDA含量通常在约1-2µM。
TAC总抗氧化能力，抗氧化剂在阻止自由基的形成和自由基清除以及其他潜在的毒性氧化物中有重要作用。抗氧化剂有三种类型：酶系统（GSH还原酶、过氧化氢酶、过氧化物酶等）、小分子（抗坏血酸、GSH、维生素E等）和蛋白（白蛋白、转铁蛋白等）。不同的抗氧化剂其还原力不同。Trolox用作抗氧化剂的标准，以相当于Trolox的抗氧化能力来表示。检测体液和其他样品中结合的非酶抗氧化能力可以提示总的清除活性氧自由基、抵抗氧化损伤和抗击氧化胁迫相关疾病的能力。某些情况下蛋白起作用，其他时候抗氧化需要小分子。小分子和蛋白都可以将Cu++转化成Cu+，蛋白mask可防止Cu++被蛋白还原，只分析小分子抗氧化剂的还原力。Cu+与显色探针螯合，在570nm有一个吸收峰，吸收值与抗氧化能力成正比。利用标准曲线即可计算出TCA总抗氧化能力。
超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）又称过氧化物歧化酶。SOD属于金属酶，按照结合金属离子种类不同，该酶有以下三种：含铜与锌超氧化物歧化酶（CUZNSOD）、含锰超氧化物歧化酶（MN—SOD）和含铁超氧化物歧化酶（Fe—SOD）。SOD主要存在于胞液和线粒体基质中，是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O2-，可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。这种酶在保护生物细胞免受超氧自由基和由其形成的活性氧类（例如H2O2,·OH）的毒害方面起着重要作用。SOD超氧化物歧化酶检测方法基于通过黄嘌呤（Xanthine）/黄嘌呤氧化酶（XOD）体系生成超氧化物阴离子。加入发色基团，发色基团可被由上述体系产生的氧化物阴离子还原成为水溶性的黄色甲染料，这样SOD活性通过抑制发生基团的还原来测定。
收费:50元/每样本，每次检测1000元起做。检测系统含阳性参照或内参，以上报价含蛋白提取。
总抗氧化能力T-AOC,超氧化物歧化酶SOD，过氧化氢酶CAT,过氧化物酶POD，丙二醛MDA,还原型谷胱甘肽GSH，NO，NOS，Cox，ROS。
1）试剂由实验室免费提供；
2）客户提供检测样品和实验设计资料；
3）三次重复检测有优惠。
专业提供生物医药实验技术服务
长沙南科生物http://www.nkbio.cn
业务经理陆勇:18229848048/14726920250
技术服务项目:病理形态学、细胞生物学、分子生物学、免疫与生化、组织与基因芯片、动物实验等
免疫学与生化实验 客户注意事项
1.客户告知实验分组、编号及背景设计资料，有具体要求请事先说明；
2.抗体：事先咨询长沙南科生物，明确抗体种属以及是否有该抗体可使用，如有一抗使用费300元每指标，如无可由双方协商而定，客户自己购买提供或我公司代购；
3.标本收集与保存：
组织样品 新鲜组织放入液氮或-70度保存，组织不少于100mg（约绿豆大小）；
培养细胞 通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-70℃，避免反复冻融）；
血液细胞标本 以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-70℃可长期保存，避免反复冻融）
血清或细胞培养液标本 离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（以上4℃可保存15-20天，-70℃可长期保存，避免反复冻融）
4.样本运输：可选以下任何的一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输；
细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶（密封保证不污染，培养液不漏出，细胞不要长得太满，50%左右，灌满培养液）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（密封保证液体不漏出，视路途远近2-3天可到达）。
