Nitrocefin 头孢硝噻吩/β-内酰胺酶活性检测底物

TOKU-E经典产品

Nitrocefin 头孢硝噻吩/β-内酰胺酶活性检测显色底物

产品标签：

Nitrocefin头孢硝噻吩；Cephalosporin 头孢菌素；beta-lactamases β-内酰胺酶活性；β-内酰胺类抗生素耐药菌筛选；CAS：41906-86-9

基本描述：

头孢硝噻吩（Nitrocefin，CAS NO：41906-86-9），具有显色特性的一种头孢菌素（cephalosporin），通常用来检测由β-内酰胺类抗生素耐药菌代谢产生的β-内酰胺酶（beta-lactamases）活性。

作用机制：

基本上所有β-内酰胺酶能以头孢硝噻吩为底物，将其β-内酰胺环上羰基碳和氮基间的酰胺键水解，可通过肉眼直接观察这一颜色变化的过程，最初完整的头孢硝噻吩处于紫外吸光区（~380nm，黄色），而水解后的产物迁移到可见光光谱区（~500nm，红色）。见下图：

图片1：溶液制备和加入β-内酰胺酶前后的溶液颜色变化

(A) ：溶于DMSO的头孢硝噻吩储存液（浓度：10mg/ml）。

(B) ：将（A）液用PBS缓冲液稀释所得到的工作液（浓度：1mg/ml）。黄色即表示具完整结构，未降解的头孢硝噻吩。

(C) ：将25U的β-内酰胺酶滴到（B）液上方。红色是由β-内酰胺酶介导的头孢硝噻吩水解后产生的颜色。

(D) ：将（C）管漩涡混匀后的图片。

基本特性：

1）   CAS NO：41906-86-9

2）   分子式：C21H16N4O8S2

3）   分子量：516.51

4）   纯度：≥95%（HPLC）

5）   外观：橘色粉末

6）   溶解性：DMSO（10mg/ml）

7）   保存方法：-20°C避光保存。储存于惰性气体下。

微生物学应用和检测方法：

1）   应用：

头孢硝噻吩（Nitrocefin）用来检测敏感性β-内酰胺类抗生素耐药菌代谢产生的β-内酰胺酶活性。

2）检测方法：

一旦接触β-内酰胺酶产生菌，样本能快速产生阳性反应。然而，建议20-30min的反应时间，同时设置阴性对照。可通过多种方法来检测，1）玻片表面反应（slide surface assay）；2）直接接触反应（direct contact assay）；3）肉汤培养液反应（broth suspension assay）；4）细胞裂解液反应（lysed cell assay）；5）滤纸法检测（filter paper assay）。

3）检测步骤：

以肉汤培养液反应（broth suspension assay）为例，其他方法请联系我司（MKbio，021-54736159）。

a，取1ml肉汤培养液，加入3-5滴1.0mg/ml的头孢硝噻吩工作液；b，20-30min内观察颜色变化，若红色产生，表示具β-内酰胺酶活性。

产品订购【原装进口，质量保证】：关于产品的任何问题欢迎来电0571-89925175联系。​

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使用文献（TOKU-E，货号：N005）：

1、Zhangming et al. used nitrocefin from TOKU-E as a substrate to study TEM-1 ß-lactamase activity from E. coli. "Label-Free Measurements of Reaction Kinetics Using a Droplet-Based Optofluidic Device."

2、Liu et al. used nitrocefin from TOKU-E to study and develop a homogeneous biosensor. "Parts-per-Million of Polyethylene Glycol as a Non-Interfering Blocking Agent for Homogeneous Biosensor Development."

3、Dahlin et al. used nitrocefin from TOKU-E in a surrogate ß-lactamase-nitrocefin assay. "A Cell-Free Fluorometric High-Throughput Screen for Inhibitors of Rtt109-Catalyzed Histone Acetylation."

4、Ohlhoff et al. used nitrocefin from TOKU-E as a substrate to study the activity of EstG34 ß-lactamases. "An unusual feruloyl esterase belonging to family VIII esterases and displaying a broad substrate range"

5、Huang et al. used nitrocefin from TOKU-E as a substrate to study the activity of VIM-2 Metallo-ß-lactamases (MBLs). "Inhibiting the VIM-2 Metallo-ß-Lactamase by Graphene Oxide and Carbon Nanotubes."

6、Eze E et al. used nitrocefin from TOKU-E to confirm beta-lactamase production in E. coli and Klebsiella species from Nigeria. Read more here: "Occurrence of Beta-Lactamases and the Antibiogram Pattern of Clinical Isolates of Escherichia coli and Klebsiella Species in Nsukka Metropolis."

7、Choi et al. measured enzymatic activity of engineered protein switches by exploiting nitrocefinhydrolysis. Read more here: "Electrochemical Activation of Engineered Protein Switches."

8、Pierre, et al. used nitrocefin from TOKU-E to measure the enzymatic acivity of various beta-lactamases. Read more here: "Molecular Determinants for Protein Stabilization by Insertional Fusion to a Thermophilic Host Protein."

9、Tullman and Nicholes, et al. used nitrocefin from TOKU-E to study and characterize enzymatic protein switches. Read more here: "Enzymatic protein switches built from paralogous input domains."

严重声明：本品仅能用作生物科研用途，不可他用。