货号: | 10223ES76 |
英文名: | EveGreen (20× in water) |
保存条件: | 4℃ |
规格: | 500µl |
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 保存 | 价格(元) |
EveGreen (20× in water) EveGreen(20×水溶液),同EvaGreen | 10223ES76 | 500 µL | 4℃ | 218.00 |
EveGreen (20× in water) EveGreen(20×水溶液),同EvaGreen | 10223ES80 | 1 mL | 4℃ | 378.00 |
EveGreen是一种新一代用于实时定量PCR(qPCR)的DNA结合染料。该染料基于“按要求释放”DNA结合技术设计,结构上由两个单体染料分子通过一个弹性臂连接成一个二聚体,在没有DNA存在时,该结构呈无荧光环状结构,一旦有DNA出现,则恢复随机形态并与DNA结合发出强烈的绿色荧光。
与市场上其他荧光染料如FAM、SYBR Green I相比,EveGreen具有更卓越的特性:1)极高的灵敏度:在推荐浓度下使用时可以获得比SYBR Green I更强的PCR扩增信号。2)PCR抑制性极小,非常适合多重PCR及HRM分析:智能化“按要求释放”DNA结合技术使得EveGreen对PCR的抑制远小于SYBR Green I。因此,使用EveGreen进行的qPCR实验可以使用快速PCR步骤。同时,EveGreen在实验中可以使用较高的浓度,从而获得远强于SYBR Green I扩增信号。较高浓度的EveGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,在推荐浓度下使用时,无扩增子之间的染料迁移现象,使EveGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲线分析(HRM)。3)超强稳定性:在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里,也可以反复冻融。4)安全性好:细胞膜穿透性测试表明,EveGreen几乎不能穿透细胞膜,安全性高。且EveGreen没有诱变性和细胞毒性。5)优越的兼容性:和SYBR Green I光谱相似,和各知名品牌的qPCR仪器兼容。用EveGreen 替代SYBR Green I,无需改变任何目前使用的操作步骤和仪器设备。qPCR完成后,无需加入其它核酸染料便能直接在凝胶成像系统下观察分析。
此外,EveGreen是目前仅有的可以用于微滴式数字PCR系统的染料,在微流控PCR,恒温扩增,毛细管电泳,DNA定量以及细胞活力鉴定等领域也具有卓越的表现。本品以20×EveGreen水溶液形式提供。
运输与保存方法
冰袋运输。4 ºC避光保存,保质期24个月。
注意事项
1)做qPCR时注意设置阳性和阴性对照。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.按照下表根据所配制体系计算各组分用量*
Reagent | Final concentration in the mixture |
ddH2O | Adjust to final volume |
Taq polymerase buffer without magnesium | 1× |
dNTP | 0.2 mM each |
MgCl2 | 2.5 mM |
EveGreen | 1× |
Taq DNA polymerase | 1-5 units per reaction |
Each of primers | 0.1-1 uM |
2)该体系需根据所使用的Taq酶的不同进行适当优化。
2.根据实验用量于冰上向无菌离心管中依次加入水,Taq polymerase buffer, dNTPs, MgCl2, EveGreen, Taq polymerase, and primers等配制qPCR反应体系(1×Master mix);
3.将1×Master mix 适量分装至无菌PCR管中,并加入DNA (50 ng/反应).
4.按照仪器类型选择合适的扩增程序。
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