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组氨酸标签蛋白染色试剂盒-Staining K
Zeocin现货Invitrogen现货
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猪瘟抗体胶体金标试纸
肝素溶液
淀粉样变染色液 （刚
染色体核型分析染色液| 货号： | D003-1 |
| CAS号： | 见说明书 |
| 供应商： | 上海雅吉生物科技有限公司 |
| 数量： | 100 |
| 英文名： | Esterase Stain |
| 保质期： | 6个月 |
| 保存条件： | 4-8度保存 |
| 注册证号： | 见说明书 |
| 规格： | 5ml×4 |
【染色原理】细胞中的碱性磷酸酶，在碱性缓冲液中，催化底物水解，生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联，生成不溶性的偶氮染料，沉着于有CAKP活性的部位。染色结果为血涂片中细胞核呈紫蓝色（苏木素复染）或绿色（甲基绿复染），阳性者胞浆中出现红至红棕色颗粒，有些为棕褐色或咖啡色颗粒。
【所需仪器】光学显微镜、玻片、染缸、滴管、秒表、记号笔等。
酸性酯酶染液产品图片
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| 500ml×3 | |||
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| 250ml×3 | |||
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| 250ml×3 | |||
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| 250ml×1 | |||
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酸性酯酶染液细胞样本的前处理
一、匀浆介质
一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
二、细胞样本的前处理:
1、细胞沉淀的收集：
① 悬浮细胞: 对于悬浮培养的细胞，直接通过离心收集细胞沉淀，将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟，弃上清留细胞沉淀。
② 贴壁细胞: 对于贴壁培养的细胞，用胰酶将细胞消化下来，或用细胞刮将细胞刮下来，将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟，弃上清留细胞沉淀。
我们一般建议客户，细胞密度最好不要小于一百万个/ml。
2、细胞沉淀的洗涤：
在细胞沉淀中加入0.5-1ml的PBS （等渗）， 轻轻颠倒混匀，将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟，弃上清留细胞沉淀。
重复上述操作反复洗涤1～2次。
3、匀浆的方式：手工匀浆，超声破碎,裂解液裂解,反复冻融。
① 手工匀浆：在细胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根据所测指标的不同而有所改变，一般加入0.5ml，细胞密度不小于一百万个/ml），混匀，将细胞悬浮于PBS中，用移液器将细胞悬浮液移至玻璃匀浆管中（2ml玻璃匀浆管），将玻璃匀浆管置于冰水混合物中，手动匀浆3分钟，然后取破碎好的细胞悬浮液进行测定。
② 超声破碎:
在细胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根据所测指标的不同而有所改变，一般加入0.5ml，细胞密度不小于一百万个/ml），混匀，将细胞悬浮于PBS中，在冰水浴条件下进行如下操作:
a、用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用400安培，5秒/次，间隙10秒反复3～5次。
b、用超声细胞破碎仪，300W功率，每次超声3～5秒，间隔30秒，重复4～5次。
③ 裂解液裂解
常用裂解液有SDS、NP-40、TritonX-100,这三种去垢剂的作用是不同的，或者说作用力量强弱不同。
1、SDS属于离子型去垢剂，最厉害，基本可以把细胞完全破掉，DNA会释放出来，裂解液变得很粘稠。
2、NP-40是很温和的去垢剂，1%浓度的基本可以破坏掉胞膜，而对核膜破坏的作用弱，结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
3、TritonX-100的能力介于NP40和SDS之间，偏向于NP40，也是常用的细胞裂解液成分之一，在保护蛋白活性方面有一定作用（SDS基本会使蛋白变性失活）。
去垢剂属性只是一方面，buffer、配比、浓度、提取方法和材料处理也都是关键因素
由于很多裂解液都是蛋白变性剂,对酶活力的测定有一定的影响,一般不推荐用裂解液进行裂解。
④ 反复冻融:
在细胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根据所测指标的不同而有所改变，一般加入0.5ml，细胞密度不小于一百万个/ml），混匀，将细胞悬浮于PBS中，放低温冰箱中结冰，溶解，再结冰，再溶解，反复3次左右）。
由于反复冻融对酶活力影响较大,一般不推荐使用
酸性酯酶染液主要用于慢性粒细胞白血病与其他类型白血病、骨髓纤维化、化脓性感染时的鉴别诊断。适用于血涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片、石蜡包埋的切片。
温馨提示：不可用于临床治疗。
