蛋白表达_SIB catalog Aug.08.pdf蛋白表达服务类别:
1)哺乳动物稳定转染细胞系构建—外源基因转染后,通过选择压力将表达载体整合到被转染细胞的基因组中,以获得的稳定表达的细胞系。哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠,提供多种翻译后加工功能,因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。
2)哺乳动物细胞瞬时表达-利用Invitrogen的FreeStyle™系统,针对悬浮CHO和293细胞进行质粒瞬时转染;可快速地获得mg级蛋白(无需构建稳定细胞系),使用的无血清培养基可简化下游纯化分泌蛋白的工作。
3)腺病毒表达—适用于在可分裂或非分裂哺乳动物细胞中进行高效瞬时表达;采用简单快速的GateWay克隆技术,重组效率高达100%;可获得高滴度的病毒(普通条件可达108 pfu/ml,浓缩后可达1011-1012 pfu/ml),有效导入培养的分裂型和非分裂型哺乳动物细胞和进行体内研究;采用了复制缺陷型的病毒,生物安全性更高
4)慢病毒表达—可以进行瞬时表达,也可以通过杀稻瘟霉素(Blasticidin)或Zeocin选择试剂进行筛选,将目的基因稳定整合到靶细胞的基因组中
5)原核表达-一般用于表达几乎所有无特殊修饰的蛋白质;可在不同的菌株中表达,同时尝试不同的诱导条件,包括:诱导时OD值、诱导温度、IPTG浓度、诱导时间。
6)酵母表达-利用高效的毕氏酵母表达系统,可在基因拷贝数、蛋白分泌信号以及标签蛋白选择等方面进行优化