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Folin---酚法测定蛋白质含量 原理:***钼酸和***钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应.蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应.Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍. 试剂:一:1,4%碳酸钠;2,0.2N氢氧化钠;3,1%硫酸铜;4,2%酒石酸钾钠。1和2等体积混合,3和4等体积混合,然后将两液以50:1混合(甲)。当天使用。二:1NFolin--酚试剂(乙)。 方法:标准曲线;试管中加0、0.2、0.40、0.60、1.00毫升酪蛋白溶液(500微克/毫升),加水补足1毫升,平行做两份。按序各加5毫升试剂(甲),摇匀,室温置放10分钟,再依次加入1N(0.5毫升)Folin----酚试剂(乙),摇匀,30摄氏度保温30分钟。然后在分光光度机上比色测定(A500)。待测样品如上反应和测定,对照标准曲线,得出含量。 注意:酚和柠檬酸对测定有干扰,低浓度尿素,胍,硫酸钠,***钠,三氯乙***对显色无影响。
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