陕西脉元生物科技有限公司依托深厚的研发实力、经验丰富的科研人员和专业的蛋白表达、纯化技术,可为客户提供毫克至百克级高纯度重组蛋白定制服务。
一、重组菌株构建
1、密码子优化
将低利用率的密码子替换为宿主常用密码子;提出问题密码子;平衡GC含量。
2、基因合成
交给基因合成公司,进行DNA的合成。
3、载体构建
百余种表达载体,十余种融合标签,三种读码框可供客户选择。
4、重组菌株构建
三十余种宿主菌,近十种筛选标记,可供客户选择。
二、原核生物重组蛋白的表达和纯化
1、摇瓶培养、诱导表达:表达载体、宿主菌、分子伴侣、诱导物、培养温度5个维度的48种表达条件矩阵。
2、细菌破碎、高速离心:超声波、高压匀浆仪2种细胞破碎方式;低温高速离心机离心
3、可溶性表达:ELISA、WB、SDS-PAGE、酶活测定
包涵体表达:SDS-PAGE 包涵体复性
4、蛋白纯化:AKTA purifier系统+预装柱:离子柱、分子筛、疏水柱及亲和层析柱
服务内容 | 周期 |
1、密码子优化和基因合成 | 1-2周 |
2、载体构建和亚克隆 | 1-2周 |
3、转化和表达、纯化小试 | 1-2周 |
4、1L表达、纯化及鉴定 | 2-3周 |
5、重组蛋白大规模制备 | 1-4周 |
6、内毒素检测、去除 | 3天 |
7、蛋白复性 | 3-4周 |
8、蛋白检测 | 1-2周 |
9、上清表达优化 | 4-6周 |
联系方式
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