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BRET2是一种接近性检测，以供体蛋白——海肾荧光素酶（Rluc）和受体蛋白——绿色荧光蛋白的突变体（GFP2）之间能量转移的检测为基础。在可渗透性底物DeepBlueC（DBC）存在时，Rluc将其氧化成coelenteramide，同时发出蓝色荧光，最大发射波长为395 nm。当受体蛋白接近时，蓝色荧光的能量被共振能量转移到GFP2上，发出绿色荧光，最大发射波长为510 nm。Rluc/DBC和GFP2之间的能量转移效率通过供体发射光强度除以受体发射光强度的比值来衡量，这个比值就是BRET2信号，反应了Rluc和GFP2的接近程度。
在实际应用中，Rluc和GFP2分别与目标蛋白形成融合蛋白，检测生物分子的相互作用，相互作用的强弱通过BRET2信号来衡量。
应用范围：蛋白相互作用，生物感应器，蛋白酶活性检测。
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