货号: | DM-1255 |
供应商: | 上海笃玛生物科技有限公司 |
数量: | 大量现货 |
保存条件: | -20温度 |
规格: | 100T |
名称:磷酸钙法细胞转染试剂盒
产品货号:DM-1255
规格:100T
储存条件:—20℃,12个月
用途:用于磷酸钙法转染细胞,适合于大多数贴壁细胞的转染
注意事项:不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定株。HEK293是最适合磷酸钙法转染的细胞之一,优化条件后转染效率可以高达85%以上,一般的转染效率可达40~50%左右
磷酸钙法细胞转染试剂盒染色方法:
(1)将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上,置37°培养16—20小时,备用。
(2)在载玻片的中部相隔一厘米处,用接种环各沾一滴蒸馏水,然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中,倾斜玻片使培养物流至另一水滴中,两水滴自然相通,菌体从上位自然扩散到下位水滴中,待干燥后染色。
(3)在干燥涂片上加甲液3—5分钟,用蒸馏水冲洗。将残水沥干或用乙液冲去残水后,加适量乙液保持30—60秒钟。染色时在酒精灯上稍加热,使染液出现蒸汽即可,用蒸馏水冲洗。
(4)镜检:菌体及鞭毛皆染成茶色。
磷酸钙法细胞转染试剂盒注意事项:
(1)染液最好随用随配,存放至次日效果则差。
(2)一定要充分洗净甲液后再加乙液,否则背景较脏。
(3)防止水及培养物沾有氯化物。
(4)切忌用接种环涂抹培养物。
(5)载玻片一定要洗净。先用洗衣粉煮沸,再水洗,干后放在洗液中,浸泡 24 小时,取出水洗除去残酸,沥干,存放于95% 乙醇中备用。
(6)加热时最好置金属板上,使载玻片受热均匀。
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