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免疫荧光(IF)
免疫荧光染色实验服务
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罗氏公司（Roche）蛋| 提供商： | 嘉美实验 |
| 服务名称： | 病理学服务：核仁组织区嗜银染色-AGNOR 染色实验服务 |
实验技术简介：核仁组成区(NORs)是染色体上的一个编码核糖体 RNA(rRNA)的片段，存在于DNA特异性环上，凸向核仁。在电镜下，核仁组成区为在电子致密区中的境界不清的浅染区域。在石蜡切片上，在核仁中见到 的每一个点状反应颗粒有可能代表多个AgNOR位点。核仁组成区嗜银蛋白染色主要特点是操作简便、批量染色的较为经济，AgNOR位点的数量增加与细胞增 殖性增加有关，对于良恶性肿瘤的鉴别具有一定的意义。
实验技术原理：细胞的核仁中有一种参与线粒体及蛋白质合成的酸性蛋白,具有嗜银性,称为核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs),可以通过胶银染色法显示出来,从而反映细胞增殖、分化情况,对良、恶性肿瘤的鉴别、分型分级、癌前病变的研究具有一定价值。
实验操作流程：
1、切片脱蜡入水，再至蒸馏水；
2、蒸馏水洗片；
3、取室温的试剂AgNOR银溶液、试剂AgNOR胶溶液等量混合，即为AgNOR染色工作液。室温孵育；
4、蒸馏水洗片；
5、(可选)甲基绿染色液复染，水洗凉干；
6、常规脱水，常规透明，非水溶性封片剂封片；
结果:AgNOR位点 核内黑色点状 。
实验注意事项：
客户提供：
1、组织样品：新鲜组织放入液氮或-80度保存，组织不少于100mg；
2、培养细胞：通过细胞计数取不少于2×106个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-80℃，避免反复冻融）；
3、血液细胞标本：以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
4、血清或细胞培养液标本：离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（4℃可保存15-20天，-80℃可长期保存，避免反复冻融）；
5、石蜡切片，冰冻切片以及细胞爬片，涂片等。
6、样本运输：可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后，加冰袋寄送；
细胞样本也可直接寄送培养瓶（密封保证不污染、培养液不漏出）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（送视路程远近2-3天可到达）。
交付标准：
1、图片；
2、完整项目报告（材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果）。
其他：
1、组织固定宜采用10%福尔马林或中性福尔马林。
2、本染色液适用于石蜡切片，切片厚度在3～4μ为宜。
3、如需复染，可在步骤4之后用中性红复染，但应注意避免过染。
4、配制好的AgNOR染色工作液易退化，所以最好即配即用，不易久置。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Tel：010-57425721/57425722 Fax：010-80780672
E-mail：lab-manager@jiamay.com
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