表达体系描述:哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子,具备蛋白折叠和翻译后修饰的功能,对翻译后的蛋白质可进行加工,因此由哺乳动物细胞表达的外源蛋白质,在生物活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。哺乳动物细胞易被重组的DNA转染,又可将表达的蛋白质产物分泌到培养基中,方便下游纯化,因此利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。哺乳动物细胞表达系统技术服务的主要项目如下,详细信息请与技术支持联系。
服务项目表达质粒的构建(目的基因亚克隆)1, 将客户提供的基因DNA片段克隆到表达载体中。2, 大提无内毒素质粒,用于转染。3, 为客户提供正确构建的重组表达质粒5 μg;含该质粒的DH5α甘油菌1 ml;提供阳性克隆质粒酶切或PCR检测电泳图;测序报告。小量转染及检测表达(瞬时转染)1, 将重组质粒转入合适的哺乳动物细胞中(293T,293F,CHO)。2, 通过SDS-PAGE和Western-blot检测目标蛋白表达情况。3, 为客户提供目标蛋白表达结果。小规模目标蛋白表达及纯化1, 瞬时转染500ml哺乳动物细胞,收集目的蛋白。2, 通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化目的蛋白。3, 通过SDS-PAGE以及Western-blot检测目的蛋白。4, 为客户提供纯化好的目的蛋白及纯化报告。大规模目标蛋白表达及纯化根据客户需求,制备合格的目的蛋白及服务报告。