表达体系描述:酵母表达属于真核表达系统,具有一定的蛋白质翻译后加工,有利于真核蛋白表达的优点。酵母培养、转化、高密度发酵等操作接近原核生物,远较真核系统简单,非常适合大规模工业化生产。酵母发酵工艺成熟,培养成本低,表达水平高,既可在胞内表达,又可分泌型表达。作为真核表达系统,毕赤酵母具有真核生物的亚细胞结构,具有糖基化、脂肪酰化、蛋***酸化等翻译后修饰加工功能。因此有些在原核表达体系中的分泌型蛋白出现不溶,或包涵体无活性等,可选择酵母表达系统避免这些问题,从而成功表达目的蛋白。本公司的酵母表达系统,具有高效、高产量、类似哺乳动物细胞表达等优点,使目的蛋白得到持久、稳定的表达。该表达系统可稳定的表达某些在其它表达系统中无法表达的蛋白。酵母表达系统技术服务按步骤收费,服务的主要项目如下,详细信息请下载说明书。
服务项目1,表达质粒的构建(目的基因亚克隆)将客户提供的基因DNA片段克隆到表达载体中。为客户提供正确构建的重组表达质粒5μg;含该质粒的DH5α甘油菌1 ml;提供阳性克隆质粒酶切或PCR检测电泳图;测序报告。2,Pichia表达菌株筛选及优化线性化重组载体,转化至表达菌株中,PCR鉴定阳性菌株。优化培养及诱导条件,提高目的蛋白的表达量。SDS-PAGE以及Western blot分析表达结果。为客户提供优化表达条件以及表达检测报告。3,目的蛋白表达及纯化1L系统中表达目的蛋白。采用一步法纯化,或附加纯化,通过SDS-PAGE以及Western blot检测目的蛋白。为客户提供纯化好的蛋白1-3mg,以及检测报告。4,大规模制备根据客户需求,可提供高达500L的大规模表达,制备合格的目的蛋白及服务报告。