PNA miRNA抑制剂特点:
- 高度的序列特异性
- 和其他抑制剂相比,PNA miRNA具有高效性
- 没有细胞毒性作用
- 具有很强的稳定性,对细胞核酸酶有很高的抵抗力
- 可室温长期保存
- 单独导入PNA,不需要任何转染试剂;如需同时导入其他大分子(例如质粒),则和常用的细胞转染试剂有极高的相容性
- 种类齐全,提供针对英国Sanger研究所miRBase Sequence数据库里所有序列的抑制剂
- 根据实验的要求,只要提供序列,就能为你定做特殊的抑制剂
和其他miRNA抑制剂的比较
PNAs™ miRNA inhibitor | LNA | 2-OMe | |
抑制miRNA效率 | +++++ | +++ | + |
特异性 | +++++ | +++ | ++ |
抵抗细胞核酸酶能力 | +++++ | ++ | + |
细胞毒性 | - | + | - |
使用转染剂 | - | + | + |
浓度 | +++ | + | ++ |
储存温度 | 室温 | -20 ℃ | -20 ℃ |
在不同的细胞中(MCF7, Hela, A549),PNA都可以有效地抑制miRNA的活性。
(下图)和其他的miRNA抑制剂(LNA(绿颜色)和2OMe(橙色))相比,PNA(蓝颜色)的抑制效率要高许多。
(下图)PNA对所作用的细胞不会产生任何的细胞毒性。左图中显示不同浓度的PNA对miR16的抑制作用。而右图则通过MTT检测发现即使在400nM的浓度下,PNA几乎不会产生任何的细胞毒作用。
(下图)PNA可以长时间地存在于细胞内。HeLa细胞接受1uM PNA的处理,经过15天后,提取细胞中的miRNA,并通过定量PCR来检测miRNA16的表达水平。我们发现PNA仍然有效地抑制内源性miRNA 的作用。No TF: no transfection.