便携式流式细胞仪MicroCyte

MicroCyte型便携式流式细胞仪

操作简单，测量精确、快速，价格便宜的流式细胞仪适合于水质、饮料、酿造、制药、生物技术和科研领域的生物分析

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MicroCyte Field型

    应用领域广、易操作的便携式流式细胞仪，用于现场进行微生物分析。MicroCyte Field型是目前市场上唯一用于现场确认潜在污染源或可疑物质的便携式流式细胞仪。这项可靠的技术被广泛应用于美国和欧洲的饮料、水质、制药和国防工业。数据输出模式为双色柱状图或二维点阵图。MicroCyte Aqua型

    MicroCyte Aqua型适用于水中微藻和其它微生物的分析。微藻本身发出的荧光可作为其摄食者原生动物（如隐孢子虫Cryptosporidium）的指示剂，用于监测饮用水净化过程。由于样品前处理简单，使得MicroCyte Aqua非常适合于整合进在线水质监测系统中。MicroCyte Aqua可以区分生物颗粒和非生物颗粒。    MicroCyte Field型和MicroCyte Aqua型都可用于分析和监测酵母菌的活性，这对酿造和酒类行业非常有帮助。死的酵母菌细胞膜破裂，会影响啤酒的口感。酒类储存时检测酵母活性有助于优化储存环境，确保只有最好的酵母被采用。

容易操作、结果客观可靠    MicroCyte既可以单机操作，也可以通过电脑操作。测量前不需要仪器调整。结果显示为每毫升多少个颗粒（个/ml）。文件可以存储为多种格式（如Excel）以备后续分析。软件提供4种数据记录模式，并且具备仪器自动清洗程序。结果以点阵图（只有MicroCyte Field型可以）或彩色柱状图显示。1.准确性计数可以在两个完全独立的区域进行。采用激光可以消除多数细菌自发荧光的影响。微藻的自发荧光使得在分析这些微生物时不用额外添加染料。2.检测限仪器检测限取决于样品背景信号的消除情况。微藻类荧光颗粒的检测限低于10个/ml。3.自动清洗软件带自动清洗程序。4.技术的先进性流式细胞术是采用激光作为光源，在液相中对生物细胞和其它显微颗粒进行快速计数和分析的技术，具有速度快、精度高、准确性好优点，是当代最先进的细胞定量分析技术。光源为寿命很长的二极管激光器，波长为635 nm。MicroCyte通过检测荧光和散射光来对0.4～15 μm的细胞或颗粒进行计数。带专利的光学设计，所有的透镜、滤光片、光源、检测器和流动池都安装在一个铝合金盒子里，具有很高的灵敏度和稳定性。MicroCyte采用电晶体光电检测器检测散射光和荧光。5.容易校正BioDETECT提供颗粒（知道大小和荧光）用于进行仪器校正，校正过程非常简单。技术参数

MicroCyte的应用1.啤酒和白酒中的酵母分析

    “MicroCyte分析计数酵母的能力比亚甲基蓝染色法精确的多。它的精确度和重复性极好”，国际酒业研究中心，2002年9月。    监测并控制酵母的活性对获得高品质啤酒非常重要。死亡的酵母细胞由于细胞膜不完整而对啤酒口感有严重影响。产品储存后监测酵母活性有助于优化存储条件，并且确保只有最好的酵母被采用。MicroCyte可以快速对酵母进行计数并检测其活性，并配套专业的试剂。这一技术在德国造酒领域有着广泛应用。    纯酵母培养液可以直接利用MicroCyte进行计数而不需要预处理（可能需要适当稀释）。对于啤酒样品，由于含有除酵母外的其它颗粒，因此需用核酸染料对酵母细胞进行染色，以便与背景信号区分开。计数总细胞（包括活细胞和死细胞）时，可以采用染料SYTO-62染色。检测酵母活性（活细胞数）时，采用TOPRO-3染料。这种染料只会对细胞膜不完整的细胞（死细胞）染色，从而将活细胞与死细胞区分开。MicroCyte会自动测量死细胞的数量并计算死细胞的百分比。实验步骤：1）样品准备抽取一定量的酵母培养液或发酵液，加入染料缓冲液中稀释。如果不需要荧光染料染色可以直接在MicroCyte上检测。2）染色若进行总细胞计数，加入一滴SYTO-62染料至1 ml稀释后的酵母溶液中。若进行死细胞计数，加入一滴TOPRO-3染料至1 ml稀释后的酵母溶液中。室温下染色1-5 min。3）计数混匀后在MicroCyte上进行计数。

2.果汁饮料中的活酵母检测

    活酵母菌的存在会大大降低果汁饮料的口感和保质期。BioDETECT建立了一套利用MicroCyte快速检测果汁饮料中是否含有活酵母的方法，并配套专业的试剂。该方法操作简单，只需24 h小时的孵育即可知道饮料中是否含有活酵母。即使只有一个酵母细胞可以生长，也会被检测出来。    在取样后（0 h）和孵育24 h后，分别用MicroCyte进行酵母计数，比较结果即可知道是否存在活的酵母菌。检测时为了将酵母菌与其它颗粒区分开，需用核酸染料TOPRO-3对酵母细胞进行染色。实验步骤：1）浓缩样品通过过滤收集样品，将滤膜转到培养板上并加入培养基。同时抽取1 ml样品直接染色并利用MicroCyte计数（0 h样品）。2）孵育将培养板上的细胞培养（孵育）24 h。3）染色用乙醇固定细胞，离心后放入染料缓冲液中，然后加入一滴TOPRO-3染料，混匀，并在室温下染色1－5 min。3）计数混匀后在MicroCyte上进行计数（24 h样品）。比较0 h和24 h的结果，看是否有酵母生长（存在活酵母）。

3.细菌、酵母和动物细胞的快速计数与活性分析

    对酿造、制药、生物技术等行业而言，监测和控制生物过程对产品质量非常重要。MicroCyte结合特制试剂可以对初始培养液或发酵液进行快速计数和活性分析。    如果培养液中的颗粒都是细胞，那么只采用散射光技术就可以进行细胞总数测定。如果样品含有非细胞性颗粒，或需要检测样品的活性，可以采用核酸染料来区分细胞性颗粒与非细胞性颗粒，或区分死细胞与活细胞。采用染料SYTO-62可以同时对死细胞和活细胞计数（总细胞数）。染料TOPRO-3只会对细胞膜不完整的死细胞染色，可以用于区分死细胞与活细胞。实验步骤：1）样品准备抽取一定量的培养液或发酵液，加入染料缓冲液中稀释。如果不需要荧光染料染色可以直接在MicroCyte上检测。2）染色若进行总细胞计数，加入一滴SYTO-62染料至1 ml稀释后的样品中。若进行死细胞计数，加入一滴TOPRO-3染料至1 ml稀释后的样品中。室温下染色1-5 min。3）计数混匀后在MicroCyte上进行计数。

4.水中细菌和其它微生物的快速检测

    利用MicroCyte结合特定试剂，可以在几分钟内确定水中是否含有微生物。这种方法可以用于检测自来水的净水过程、纯净水的加工过程、废水处理过程、泳池水质监测、以及制药、食品等行业的水质监测等。    不需任何预处理即可快速检测水中是否含有颗粒（散射光）和微藻（自发荧光）。如果需要检测水中的总微生物数量，可以采用核酸染料染色后通过测量荧光来计数。实验步骤：1）样品准备取一定量的样品，加入染料缓冲液中稀释。如果不需要荧光染料染色可以直接在MicroCyte上检测。2）染色若进行包括微藻在内的总微生物细胞计数，加入一滴SYTO-62染料至1 ml稀释后的样品中。室温下染色1-5 min。3）计数混匀后在MicroCyte上进行计数。

5.水中微藻和隐孢子虫的快速检测

    利用MicroCyte在几分钟内就可确定水中是否含有微藻等自发荧光颗粒。这些自发荧光颗粒可以作为其摄食者原生动物（如隐孢子虫Cryptosporidium）的指示剂。MicroCyte可以用于监测饮用水净化过程中微藻和原生动物是否清除干净。由于样品用量少、检测快速，使得MicroCyte可以整合进水质在线监测系统中。即使每毫升水中的自发荧光颗粒数低于10个，也可被MicroCyte检测到。这种方法在医药卫生和食品行业已成功应用多年。    不需任何预处理即可快速检测水中颗粒数（散射光）和微藻数（自发荧光）。净水过程（如絮凝剂的加入）会改变水中的总颗粒数，但不会引起自发荧光颗粒（微藻）数目的增长。因此，自发荧光颗粒的数目是反映净水效果的理想指标。实验步骤：1）样品准备水样经100 μm的滤膜过滤。2）计数取1 ml水样到Eppendorf管中，混匀并在MicroCyte上计数。微藻数目直接以个/ml显示。

6.空气、水和可疑物品中细菌与孢子的快速检测

    利用MicroCyte结合核酸染料可以快速判断空气、水和粉末样品中是否含有（危险的）微生物。MicroCyte可被用于国防、海关和公共卫生机构，以及机场、车站等公共场合。     空气、水或粉末中的微生物经过核酸染料染色后，在MicroCyte中可以与其它颗粒区分开。能发出荧光的颗粒就被确定为微生物细胞。实验步骤：1）样品准备利用气体采样器采集空气中的微生物并溶入液体中。水样可以被直接分析。粉末状样品先溶于水中后再分析。加入乙醇固定细胞。2）染色利用染料缓冲液稀释样品并加入TOPRO-3染色，混匀后染色1-5 min。3）计数混匀并在MicroCyte上进行计数。