仪器应用Ettan™ MDLC是生物相容的液相色谱(LC)系统,提供了蛋白质预分离和纳升级多维肽分离方面的双重功能.使用这个系统,根据样品的复杂性和研究要求,可以选择三个专门化流路配置之一完成多维液相色谱(MDLC).Ettan MDLC基于ÄKTA™ design的已被证实的性能及其所提供优异的灵敏度和宽广的动力学范围,使包含高和低丰度蛋白的复杂混合物的分析成为可能。系统设计为和电喷雾质谱仪使用接口连接,使得能够通过MDLC-MS/MS进行快速蛋白质鉴定。 和串联质谱(MS/MS)联用的多维液相色谱(MDLC),作为识别和鉴定一些通常难以使用其它方法分离的蛋白质(例如,低丰度蛋白、疏水膜蛋白、极小和极大蛋白以及极碱和极酸蛋白)的一种可靠技术,正在被迅速广泛地接受。从这些蛋白质获得的胰酶酶解肽段可以通过离子交换(IEX)和反相层析(RPC)的结合使用得到分离。使用这个方法,在一个工作日内,我们可以分离多样品,随后并通过MDLC-MS/MS鉴定。 当前,优化蛋白质的多维液相方法通常多考虑到随后的质谱分析。相应地,对优化层析步骤以获得最好的分离性能却给予很少的关注。Ettan MDLC克服了这个问题,既提供了高工作循环纳升级液相色谱又能对复杂样品混合物进行高效的预分离。 Ettan MDLC的所有组件均用惰性及生物相容性材料制备,无论应用任何层析方法时,都能确保高回收率并易于清洗。而且,整合了Thermo Electron 系列的离子阱质谱仪并且和其它电喷雾质谱仪有接口连接的Ettan MDLC,使得蛋白质组学中的样品能够被有效地分析。 仪器特点1. 流路系统生物兼容性对检测低丰度蛋白,蛋***酸化和其他翻译后修饰至关重要,保证样品完整性。 2. 宽动态范围:第一向的高上样量,及第二向nano RPC 的高灵敏度显示了无以伦比的动态范围。 3. 高流速精确性保证极佳的保留时间的重复性。 4. 高通量,快速,即便是最复杂的样品,经由MDLC分离后,LTQ也可分析,LTQ 具有独一无二的快速分析的能力。 5. 双泵系统可实现一系列独到的,全自动的MDLC方法。 6. 带有直接流速***的高压梯度混合,提高了分辨率,精确度和重复性,使峰宽最小化,保证样品峰的浓度,从而达到最高灵敏度与分辨率。 7. 独有的电导检测流动池,结合在柱实时监测的梯度曲线和盐阶段曲线,可帮助诊断系统性能。 8. 灵活性出众,覆盖了分析型,精密型,毛细管型和 nanoflow 的所有应用。 9. 双重功能:肽及蛋白预分离和肽水平上的纳升级LC-MS应用在同一系统中实现。 10. 高通量,提高灵敏度,实现无损耗进样。 11. 双检测器实现无敌的灵敏度;自动进行多级质谱的扫描,提高了蛋白鉴定的覆盖率。 12. 自动化的方法。 13. 预设的方法加上专用的柱子,Trap柱和管路实现自动化应用。 仪器参数1.流速:0.001-2ml/min 2.压力范围:0-35MPa 3.波长范围:214nm 4.专利的 nano-阀 & 极小的死体积 5.自动进样器 –半导体冷却 6.Finnigan LTQ 线性离子阱质谱。