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基因敲除（Knockout） I ES细胞同源重组技术途径 原理 构建以筛选基因新霉素（Neo）取代敲除基因的一个或多个外显子的质粒，转入ES细胞，获得正确发生同源重组的ES克隆。ES细胞进行囊胚注射，获得部分ES来源的嵌合鼠，嵌合鼠与野生型小鼠交配，最终获得来源于重组ES细胞的杂合子小鼠。杂合子小鼠一条染色体上的靶基因exon被Neo基因所取代，杂合子交配获得目的基因失活的纯合子小鼠。 服务周期 7-15个月 II Crispr/Cas9技术途径 原理 根据基因序列设计合成gRNA与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质，Cas9核酸酶、gRNA、基因组靶序列结合并切割双链DNA，通过非同源性末端接合（NHEJ）修复途径或片段缺失造成靶基因的移码突变，从而实现基因敲除。NHEJ修复是随机的，可能在同一小鼠体内不同细胞造成的修复结果不同，敲除小鼠需要繁殖一代，获得稳定遗传的敲除杂合子小鼠。 服务周期 5-7个月 I ES细胞同源重组技术途径
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