荧光定量RT-PCR
实时荧光定量PCR(real time PCR,RT-PCR)就是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光物质,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,并据此推断目的基因的初始量,同时可以得到一条荧光扩增曲线图。
目前,实时荧光PCR技术已经被广泛应用于基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等领域。
我们提供实时荧光定量PCR服务包括:
相对定量和绝对定量
SYBR Green法、TaqMan探针法
提供引物设计,RNA提取,反转录,qPCR检测
标准品制备
数据分析和详尽的实验报告
先进的仪器:
拥有先进的ABI-step one plus实时荧光定量PCR仪,它具有时间省、灵敏度高、准确性好和线性范围宽等优点。
严格的质量控制:
预实验检测引物与模板结合特异性,优化实验条件,并通过严格的QC保证结果的准确性
RT-PCR主要应用
1.DNA或RNA的绝对定量分析:包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测,RNAi基因失活率的检测等
2.基因表达差异分析:比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等),特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的确证
3.基因分型:SNP检测
服务流程:
1.根据目的基因设计引物
2.RNA抽提
3.RNA定量及质量分析
4.逆转录
5.实时定量PCR检测
6.数据分析
7.向客户提供数据分析结果和实验报告
客户提供:尽可能新鲜和足量的组织(>50-100mg)、细胞样品(106)或者血清,或者直接提供纯化好的Total RNA(>1ug/样品)