背景知识:
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具。1996年,美国Applied Biosystems公司推出了一种新定量试验技术——实时荧光定量PCR,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线***反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模版的初始浓度。
技术原理:
PCR扩增时在加入一对引物的同事加入一个特异性的荧光探针,该探针作为一寡核苷酸,两端分别标记了一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时,探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5端—3端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
服务流程:
1.根据基因名称查询序列,设计引物、探针。
2.提取核酸(DNA/ RNA)。
3.荧光定量PCR扩增,结果分析。
4.提供完整的实验资料(实验记录、实验结果、引物探针等技术资料)。
总RNA提取 | 总DNA提取 | 质粒提取 |
荧光定量PCR | 定性PCR | PCR-SSCP |
PCR-RFLP | PCR-SSP | 基因测序 |
逆转录反应 | 克隆构建 | 质粒转化 |
原位杂交实验 | SiRNA实验 | 慢病毒包装实验 |
核酸生物信息学分析 | 引物探针合成 | 核酸荧光原位杂交 |
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