点击图片查看原图

焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术服务

产品价格: 面议

最小起订量:暂无 可售数量:暂无

发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-23 01:30:07
浏览次数:
2569

产品详情

品牌名称:
       本公司的焦***酸测序(Pyrosequencing)技术服务基于QIAGEN公司的PyroMark Q96 ID平台,能提供基于序列测定的SNP基因分型、等位基因频率分析和甲基化检测,杂合子缺失及细菌和病毒分型等技术服务。

焦***酸测序(Pyrosequencing)技术的原理

       首先通过PCR制备待测序的DNA模板,PCR的引物之一是用生物素标记的。PCR产物和偶连avidin的Sepharose微珠孵育,DNA双链经碱变性分开;纯化得到含生物素标记引物的待测序单链,并和测序引物结合成杂交体。 Pyrosequencing技术是由四种酶催化的同一反应体系中的酶级连反应,四种酶是:DNA聚合酶(DNA polymerase)、硫酸化酶(ATP sulfurylase)、荧光素酶(luciferase)和双***酸酶(apyrase).反应底物为adenosine 5′ phosphosulfate (APS)、荧光素(luciferin)。反应体系还包括待测序DNA单链和测序引物。反应体系配置好后就可以加入底物dNTP进行序列分析了。 测序反应是这样进行的:在每一轮测序反应中,只能加入四种dNTP(dATP S,dTTP,dCTP,dGTP)之一,如该dNTP与模扳配对,聚合酶就可以催化该dNTP掺入到引物链中并释放焦***酸基团(PPi)。掺入的dNTP和释放的焦***酸是等摩尔数目的.注意:反应时deoxyadenosine alfa-thio triphosphate (dATP S)是dATP的替代物,因为DNA聚合酶对dATP S的催化效率比对dATP的催化效率高,且dATP S不是荧光素酶的底物。 硫酸化酶催化APS和PPi形成ATP,ATP和焦***酸的摩尔数目是一致的。ATP驱动荧光素酶介导的荧光素向氧化荧光素(oxyluciferin)的转化,氧化荧光素发出与ATP量成正比的可见光信号。光信号由CCD摄像机检测并由pyrogram™反应为峰。每个峰的高度(光信号)与反应中掺入的核苷酸数目成正比。ATP和未掺入的dNTP由双***酸酶降解,淬灭光信号,并再生反应体系。然后就可以加入下一种dNTP。 随着以上过程的循环进行,互补DNA链合成,DNA序列由Pyrogram的信号峰确定。

系统用途:

多用途遗传分析系统,可应用于各种遗传多态性标记的分析检测,如SNP、突变、插入/缺失、甲基化、基因拷贝数等;等位频率分析;此外,还可应用于各种微生物的鉴定、分型、耐药性评估,并可对多种亚型或野生株及突变株、耐药株组成的复杂群体中的各个组分含量直接加以定量评估;

本公司提供的技术服务:

1.常规SNP检测

优势: ♦ 单一位点的质量评估和序列信息

            ♦ 分析含有CpG位点的SNP

            ♦ 序列信息中不同位点的频率计算

            ♦ 适用于新鲜冷冻,和石蜡包埋的样本

            ♦ 不同的应用实验可同时在一次运行中实现

            ♦ PCR反应之后,1个小时内可同时平行分析96个样本

2.甲基化检测服务

    基本流程 在表观遗传学的DNA甲基化研究中,新一代的测序方法可得到大量的全基因组甲基化特征数据,需要验证其中特定靶序列与表观遗传修饰的生理相关性。此验证过程较具挑战性,因为甲基化位点的位置和频率的微小改变也会带来明显的变化。焦***酸测序可在一次检测中快速定量一个或多个甲基化位点,是理想的验证方法。因此该技术在表观遗传学研究中逐渐成为数据分析的金标准。 设计甲基化分析反应体系往往十分复杂,因为在非CpG位点胞嘧***转化为胸腺嘧***会影响引物的结合。为了解决这个问题,QIAGEN最近研发出了针对特定基因的预设计PyroMark CpG Assays,可覆盖整个人类基因组。这些试剂盒可用于CpG甲基化分析,并扩展了靶序列和CpG岛的选择范围。

优势  ♦ Pyrosequencing 能测定邻近CpG区域的单个甲基化水平,甚至包括测序的引物区域

         ♦ 启动子序列中接近的不同CpG岛的甲基化频率计算

         ♦ 适用于新鲜冷冻,和石蜡包埋的样本

         ♦ 不同的应用实验可同时在一次运行中实现

         ♦ PCR反应之后,1个小时内可同时平行分析96个样本

 

 

免责声明

本网页所展示的有关【焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术服务】的信息/图片/参数等由的会员【上海捷兰生物技术有限公司 】提供,由【生物实验采购网】会员【上海捷兰生物技术有限公司 】自行对信息/图片/参数等的真实性、准确性和合法性负责,本平台(本网站)仅提供展示服务,请谨慎交易,因交易而产生的法 律关系及法律纠纷由您自行协商解决,本平台(本网站)对此不承担任何责任。您在本网页可以浏览【焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术服务】有关的信息/图片/价格等及提供 【焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术服务】的商家公司简介、联系方式等信息。

在您的合法权益受到侵害时,请您致电,我们将竭诚为您服务,感谢您对【生物实验采购网】的关注与支持!

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。