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细胞自噬Autophagy research(hLC3慢病毒和腺病毒)

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2021-05-25 01:30:01
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品牌名称:

 

 自噬(Autophagy)是一类细胞内物质降解的代谢过程,待降解的胞内物质首先被自噬小泡包裹,随后被溶酶体中的水解酶降解。研究发现微管相关蛋白轻链3MAP-LC3),简称LC3,参与了自噬的形成,并被证明了是哺乳动物细胞中常见的自噬小体标记蛋白之一。

Western blot可能会检测到LC3的两种形式,这是由于自噬形成时,胞浆型LC3会酶解掉一小段多肽形成LC3-ILC3-I跟***脂酰乙醇胺即脑***脂(PE)结合转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),这两种形式在正常细胞中都是存在的,而发生自噬的细胞中LC3-II会有明显的增加。

自噬主要是通过ULK complex***酸化Beclin-1,激活脂酶VPS34,诱导了细胞自噬发生,因此可以通过ULK complex Beclin-1的相关基因的抑制剂来抑制自噬的形成,包括的靶点有 MAP kinases, JNK1, ERK p38。同时,细胞自噬还涉及了多种信号通路,如哺乳动物雷帕霉素靶点mTOR信号通路,是依赖mTOR的相关信号通路形成自噬的重要途径。另外,其它信号通路中,如3-甲基腺嘌呤(3-MA)可以通过抑制Class PI3K的活性抑制自噬;GTP结合的G蛋白亚基Gαi3抑制自噬;GDP结合的Gαi3蛋白活化自噬;死亡相关蛋白激酶(death-associated protein linase,DAPK)和DAPK相关蛋白激酶(DAPK-related protein kinase-1,DRP-1)诱导自噬。PKAcasein激酶 Ⅱ、MAP激酶、calcium途径也在自噬错综复杂的调控网格中,但其机制还不甚清楚。

自噬流程图

产品

现货供应LC3 plasmid ,adenovirus and lentivirus(Autophagy)/LC3质粒、慢病毒和腺病毒(细胞自噬)

GFP-LC3 单荧光自噬指示体系:

利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的原理:无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。但是绿色斑点增多并不一定代表自噬活性增强,也有可能是自噬溶酶体降解途径受阻,可以通过western blot 检测游离的GFP、p62来验证。

mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系:

用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。自噬溶酶体由于溶酶体内部的酸性环境,可以导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱可指示自噬溶酶体形成的顺利程度,GFP越少,则从自噬小体到自噬溶酶体阶段流通得越顺畅。反之,自噬小体和溶酶体融合被抑制,自噬溶酶体进程受阻。mRFP是一直稳定表达的,因而可以通过GFP与mRFP的亮点比例来评价自噬流进程。

哺乳动物表达质粒

名称

描述

货号

规格

价格()

pGM-CMV-GFP-hLC3 质粒

Human LC3基因与GFP融合表达哺乳动物表达质粒

GM-1314P101H

1ug

3500

慢病毒

名称

描述

货号

规格

价格()

pGMLV-GFP-hLC3 慢病毒

Human LC3基因与GFP融合表达慢病毒颗粒

GM-1314L201H-S

50ul*4(>1*108TU/ml)

 3749

GM-1314L201H-M

50ul*8(>1*108TU/ml)

 5949

pGMLV-CMV-RFP-GFP-hLC3 慢病毒

Human LC3基因双标GFP,RFP慢病毒颗粒

GM-1314L204H-S

50ul*4(>1*108TU/ml)

 3749

GM-1314L204H-M

50ul*8(>1*108TU/ml)

 5949

腺病毒

名称

描述

货号

规格

价格()

pGMAD-CMV-GFP-hLC3 腺病毒

Human LC3基因与GFP融合表达腺病毒颗粒

GM-1314R203H-S

100ul*5(>1*1010TU/ml)

 3279

GM-1314R203H-M

100ul*10(>1*1010TU/ml)

 5899

pGMAD-CMV-RFP-GFP-hLC3 腺病毒

Human LC3基因双标GFP,RFP腺病毒颗粒

GM-1314R202H-S

100ul*5(>1*1010TU/ml)  

 3279

GM-1314R202H-M

100ul*10(>1*1010TU/ml)

 5899

自噬的调控通路

1.   依赖mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶点)途径的自噬

   1)PI3K-AKT-mTOR信号通路    2)AMPK-TSC 1/2-mTOR 信号通路

2.   其它的信号通路

  1)3-甲基腺嘌呤(3-MA)通过抑制Class ⅢPI3K的活性抑制自噬。

  2)beclin1和UVRAG作为正调控子,抗凋亡因子bcl-2作为负调控子共同参与组成ClassⅢPI3 复合物调控自噬。

  3)GTP结合的G蛋白亚基Gαi3抑制自噬;GDP结合的Gαi3蛋白活化自噬。

  4)死亡相关蛋白激酶(death-associated proteinlinase,DAPK)和DAPK相关蛋白激酶(DAPK-related protein kinase-1,DRP-1)诱导自噬。

  5)PKA、casein激酶 Ⅱ、MAP激酶、calcium途径也在自噬错综复杂的调控网格中,但其机制还不甚清楚。

  自噬相关基因

名称

基因功能描述

Gene ID

载体

规格

货号

价格(元)

ANXA1

Responsible for Protein Targeting to Membrane;CDS

NM_000700.1

PCDNA3

 1ug

GM-LC001

询价

ATG3

Responsible for Protein Transport;Involved in Protein Ubiquitination

NM_022488.3

PCDNA3

 1ug

GM-LC002

询价

ATG4A

Autophagic Vacuole Formation;Responsible for Protein TransportProtease Activity

NM_052936.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC003

询价

ATG4B

Autophagic Vacuole Formation;Responsible for Protein Transport;Protease Activity

NM_013325

PCDNA3

 1ug

GM-LC004

询价

ATG5

Autophagic Vacuole Formation;Co-Regulators of Autophagy and Apoptosis

NM_001286106

PCDNA3

 1ug

GM-LC005

询价

ATG7

Responsible for Protein Transport;Involved in Protein Ubiquitination

NM_006395.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC006

询价

ATG10

Responsible for Protein Transport

NM_031482

PCDNA3

 1ug

GM-LC007

询价

ATG12

Involved in Autophagic Vacuole Formation;Co-Regulators of Autophagy and Apoptosis

NM_004707.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC008

询价

ATG13

Autophagy in Response to Other Intracellular Signals

NM_014741.3

PCDNA3

 1ug

GM-LC009

询价

ATG14

Autophagy in Response to Other Intracellular Signals

NM_014924.3

PCDNA3

 1ug

GM-LC010

询价

ATG16L1

Involved in Autophagic Vacuole Formation;Responsible for Protein Transport

NM_030803.6

PCDNA3

 1ug

GM-LC011

询价

BECN1

Involved in Autophagic Vacuole Formation;Co-Regulators of Autophagy and Apoptosis

NM_003766

PCDNA3

 1ug

GM-LC012

询价

RB1CC1

 

NM_014781

PCDNA3

 1ug

GM-LC013

询价

GABARAPL1

Involved in Autophagic Vacuole Formation

NM_031412.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC014

询价

IRGM

Involved in Autophagic Vacuole Formation

NM_001145805

PCDNA3

 1ug

GM-LC015

询价

LAMP2

 

NM_002294.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC016

询价

LC3A

Involved in Autophagic Vacuole Formation

NM_032514.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC017

询价

LC3B

Involved in Autophagic Vacuole Formation

NM_022818.4

PCDNA3

 1ug

GM-LC018

询价

LRSAM1

 

NM_138361.5

PCDNA3

 1ug

GM-LC019

询价

RAB7A

 

NM_004637.5

PCDNA3

 1ug

GM-LC020

询价

ULK2

Autophagy in Response to Other Intracellular Signals

NM_014683

PCDNA3

 1ug

GM-LC021

询价

UVRAG

Autophagy in Response to Other Intracellular Signals

BC064837

PCDNA3

 1ug

GM-LC022

询价

VPS15(PIK3R4)

Autophagy in Response to Other Intracellular Signals

NM_014602.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC023

询价

VPS34(PIK3C3)

Autophagy in Response to Other Intracellular Signals

NM_002647.2

PCDNA3

 1ug

GM-LC024

询价

细胞自噬相关的小分子抑制剂系列

      细胞自噬是细胞通过自身形成的自噬囊泡,吞噬胞浆内变性蛋白质和细胞器,通过微管相关蛋白,以动力依赖性的方式转运至溶酶体降解的过程,同时它也可以将细胞内的微生物致病体移除出去。

     自噬主要是通过ULK complex***酸化Beclin-1,激活脂酶VPS34,诱导了细胞自噬发生,因此可以通过ULK complex 和Beclin-1的相关基因的抑制剂来抑制自噬的形成,包括的靶点有 MAP kinases, JNK1, ERK 和 p38。同时,细胞自噬还涉及了多种信号通路,如哺乳动物雷帕霉素靶点mTOR信号通路,是依赖mTOR的相关信号通路形成自噬的重要途径。另外,其它信号通路中,如3-甲基腺嘌呤(3-MA)可以通过抑制Class Ⅲ PI3K的活性抑制自噬;GTP结合的G蛋白亚基Gαi3抑制自噬;GDP结合的Gαi3蛋白活化自噬;死亡相关蛋白激酶(death-associated protein linase,DAPK)和DAPK相关蛋白激酶(DAPK-related protein kinase-1,DRP-1)诱导自噬。PKA、casein激酶 Ⅱ、MAP激酶、calcium途径也在自噬错综复杂的调控网格中,但其机制还不甚清楚。

自噬抑制剂

 

Inhibitors of Beclin1

名称

描述

货号

规格

价格()

SP600125

一种广谱JNK抑制剂,作用于JNK1 JNK2JNK3时,IC50分别为40 nM 40 nM90 nM

GM-14GC001(10)

10mg

1249

GM-14GC001(50)

50mg

3899

GM-14GC001(100)

100mg

5159

U0126

一种高度选择性的MEK1/2抑制剂,IC500.07 μM/0.06 μM

GM-14GC002(5)

5mg

839

GM-14GC002(25)

25mg

1239

GM-14GC002(50)

50mg

2189

GM-14GC002(100)

100mg

3939

GM-14GC002(500)

500MG

10649

GM-14GC002(1G)

1G

14889

Inhibitors of autophagosome / autophagolysosome formation

名称

描述

货号

规格

价格()

3-Methyladenine3-甲基腺嘌呤

一种选择性PI3K抑制剂,作用于Vps34PI3KγIC50分别为25 μM60 μM

GM-14GC003(10)

10mg

429

GM-14GC003(50)

50mg

1369

GM-14GC003(100)

100mg

2159

Chloroquine diphosphate salt 氯喹 二***酸盐

一种4-氨基喹啉的抗疟疾和抗风湿药剂。

GM-14GC004(500)

500MG

599

GM-14GC004(1G)

1g

1029

GM-14GC004(5G)

5g

1949

SB 202190 (SB202190,FHPI)

一种有效的p38 MAPK抑制剂,靶向作用于p38α/βIC5050 nM/100 nM

GM-14GC005(25)

25mg

1249

GM-14GC005(50)

50mg

2139

GM-14GC005(100)

100mg

3039

Wortmannin (KY 12420,Antibiotic SL-2052)渥曼青霉素

一种PI3K抑制剂,IC503 nM,抑制自噬体的形成。

GM-14GC006(1)

1mg

439

GM-14GC006(10)

10mg

2449

 

 

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咨询电话:021-50432825

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