REPOTMNanog报告基因慢病毒
REPOTMNanog报告基因慢病毒是吉满生物自主研发的用于检测Nanog转录活性水平为目的的报告基因慢病毒颗粒。Nanog是近年来在胚胎干细胞(ES细胞)内发现的一个重要转录因子,该因子对维持ES细胞的自我更新及全能性起着关键作用。
REPOTMNanog报告基因慢病毒主要用于检测Nanog在细胞中的表达、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMLV-Nanog-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒载体的多克隆位点插入了多个Nanog结合位点,可以高灵敏度地检测Nanog的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞,比如原代细胞,干细胞,神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内,实现稳定转染。
质粒元件信息:
5'LTR | 1-635 |
PBS (primer binding site) | 636-653 |
Ψ (packaging signal) | 685-822 |
RRE (Rev-response element) | 1303-1536 |
cPPT (central polypurine tract) | 2028-2151 |
Nanogresponse element | 2191-2240 |
Luciferase | 2306-3958 |
PPGK(phosphoglycerate kinase promoter) | 3988-4496 |
Puror(puromycin resistance gene) | 4517-5116 |
WPRE(woodchuck posttranscriptional regulatory element) | 5130-5721 |
3'LTR | 5924-6560 |
PUC origin of replication | 7703-7030 |
Ampr | 8844-7848 |
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
GM-022013 | REPOTMNanog报告基因慢病毒 | 50ul×4管;2×10e7TU/ml |
- | 说明书 | - |
使用说明:
Nanog报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项:
1. 病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。
2. 病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。
3. 操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次**钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次**钠溶液浸泡1h以上后弃去。
4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。
5. 病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
保存条件:
-80℃保存。(如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度)
参考文献:
[1]Lei L, Li L, Du F, Chen CH, Wang H, Keefer CL.Monitoring bovine fetal fibroblast reprogramming utilizing a bovine NANOG promoter-driven EGFP reporter system.MolReprod Dev. 2012 Dec 27. doi: 10.1002/mrd.22147.
[2] Tanimura N, Saito M, Ebisuya M, Nishida E, Ishikawa F.Stemness-related factor Sall4 interacts with transcription factors Oct-3/4 and Sox2 and occupies Oct-Sox elements in mouse embryonic stem cells.J Biol Chem. 2012 Dec 26.
[3] Li W, Tian E, Chen ZX, Sun G, Ye P, Yang S, Lu D, Xie J, Ho TV, Tsark WM, Wang C, Horne DA, Riggs AD, Yip ML, Shi Y.Identification of Oct4-activating compounds that enhance reprogramming efficiency.ProcNatlAcadSci U S A. 2012 Dec 18;109(51):20853-8. doi: 10.1073/pnas.1219181110. Epub 2012 Dec 3.
[4] Dang H, Ding W, Emerson D, Rountree CB.Snail1 induces epithelial-to-mesenchymal transition and tumor initiating stem cell characteristics.Dang H, Ding W, Emerson D, Rountree CB.BMC Cancer. 2011 Sep 19;11:396. doi: 10.1186/1471-2407-11-396.
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