基因组编辑工具----CRISPR/Cas9系统
CRISPR/ Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最近几年兴起用于靶向基因特定DNA修饰的重要工具。CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。细菌在CRISPR和Cas9的帮助下,可以经由小RNA分子的引导,靶标和沉默入侵者遗传信息的关键部分。在该系统中,crRNA(CRISPR-derived RNA)与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成的复合物能特异性识别靶基因序列,并引导Cas9核酸内切酶在靶定位点剪切双链DNA,随后,细胞的非同源末端连接修复机制(NHEJ)重新连接断裂处的基因组DNA,并引入插入或缺失突变。我们也可以提供一个外源双链供体DNA片段(Donor)通过同源重组(HR)整合进断裂处的基因组。从而达到对基因组DNA进行修饰的目的。目前,CRISPR-Cas9系统的高效基因组编辑功能已被应用于多种模式生物,包括人、小鼠、大鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫、植物及细菌。
吉满提供
l 多种可选方案适应各种细胞:普通载体,Cas9/Donor腺病毒颗粒,Cas9慢病毒颗粒
l 丰富的HR Donor Vector载体协助完成Gene Knock-Out,Knock-in或Gene标记。
l 定制gRNA和HR供体载体设计服务
l 基因敲除细胞稳转株服务
原理示意图
CRISPR与RNAi的区别:
方法 | 靶标 | 质粒构建 | 基因下调 | 基因敲除 | 基因定点突变或多点突变 | 基因组改变 | 遗传密码子改变 | 遗传性 |
RNAi(siRNA,shRNA) | mRNA(转录水平) | 简单 | yes | | NO | NO | NO | siRNA:瞬转 ; shRNA:可借助慢病毒实现遗传性 |
CRISPR | DNA序列(基因组水平) | 简单 | | yes | yes | yes | yes | yes |
TALEN | DNA序列(基因组水平) | 复杂 | | yes | yes | yes | yes | yes |
技术优势
※操作简单,靶向精确性更高。
※可实现对靶基因单个位点或多个位点同时敲除。
※也可同时对多个靶基因进行敲除。
※CRISPR/Cas9系统是由RNA调控的对DNA的修饰,其基因修饰可遗传。
※拥有CRISPR/Cas9腺病毒/慢病毒系统,对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用。
客户提供
1. 物种、基因名称或者基因ID;
2. 提供靶细胞。
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