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人OP酶联免疫检测试剂| 货号： | ZY-36087 |
| 供应商： | 泽叶生物 |
| 数量： | 50 |
| 保质期： | 12个月 |
| 保存条件： | 2～8℃避光保存 |
| 规格： | 盒 |
猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使用说明书
【产品名称】使用说明书
通用名：猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Porcine Pseudorabies virus gE (ELISA)
【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒
【预期用途】 伪狂犬病又名奥耶斯基氏病（Aujeszky's disease），是由伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的家畜和多种野生动物的一种以发热、奇痒、呼吸和神经系统疾病为特征的急性传染病。该病免疫预防用的疫苗为gE基因缺失疫苗（也有联用gI、TK基因缺失）,因此检测gE蛋白的抗体可作为野毒感染的指标。
本试剂盒用于检测猪血清中抗伪狂犬病毒gE蛋白的抗体，可用于区别临床野毒感染猪和用gE基因缺失疫苗免疫的猪。
【原 理】
本试剂盒系由预包被猪伪狂犬病毒重组gE蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中伪狂犬病毒gE蛋白抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有伪狂犬病毒gE蛋白抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有伪狂犬病毒gE蛋白抗体。
【试剂盒组成】
| 序号 | 名称 | 规格（96T×1） | 规格（96T×2） |
| 1 | 酶标板 | 96T×1 | 96T×2 |
| 2 | 酶标记物 (红盖) | 11ml×1 | 11ml×2 |
| 3 | 抗体工作液 (蓝盖) | 5.5ml×1 | 11ml×1 |
| 4 | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1 | 40ml×1 |
| 5 | 底物液A (白盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
| 6 | 底物液B (黑盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
| 7 | 终止液 (黄盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
| 8 | 阳性对照 (红盖) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
| 9 | 阴性对照 (绿盖) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
| 10 | 盖板膜 | 1张 | 2张 |
| 11 | 自封袋 | 1个 | 1个 |
| 12 | 说明书 | 1份 | 1份 |
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释（如2μl血清加入198μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照≤0.10，阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.38为阳性；样品A值在0.2到0.38之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。
2.本实验结果为阳性表明该猪可能有野毒感染，或是用非gE基因缺失疫苗免疫的。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪血清、血浆中猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
温馨提示：不可用于临床治疗。
