试剂盒组成成分1、 左臂———线性化的三合一质粒:质粒含CMV启动子驱动的人源化Cas9n(Cas9 缺口酶)表达元件、 人U6启动子驱动客户特异sgRNA表达 (待重组) 的表达元件以及如下的抗性基因表达元件: SV40 启动子驱动的Neomycin 抗性基因表达元件 EF1a 启动子驱动的 Puromycin 抗性基因表达元件2、 右臂———线性化的三合一质粒: 质粒含CMV 启动子驱动的人源化Cas9n (Cas9 缺口酶)表达元件、 人U6启动子驱动客户特异sgRNA表达 (待重组) 的表达元件以及如下的以非洲爪蛙EF1a 启动子驱动的荧光报告基因的表达元件。 eGFP (绿色荧光蛋白) mCherry (红色荧光蛋白) eCFP (青色荧光蛋白) eYFP (黄色荧光蛋白)3、1 退火缓冲液4、T4 连接酶5、5 T4连接缓冲液6、正向引物F-lk(用于验证客户gRNA重组后获得的质粒)7、超纯水