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AdMax腺病毒pBHGloxdelE13cre骨架及穿梭质粒pDC315，pDC315-shRNA1，pDC315-EGFP

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最后更新：: 2021-07-01 01:30:03

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常用腺病毒载体的包装方法包括： 1) 经典的同源重组法（双质粒共转染）：原理是同源重组。在腺病毒左臂区域（通常缺失E1基因区）插入目的基因表达盒构成腺病毒穿梭质粒，与带有腺病毒全基因组（通常缺失E1基因区）的大质粒共同转染携带E1基因区的细胞如293细胞，两种质粒在293细胞内通过同源重组形成重组腺病毒基因组，并包装成病毒颗粒。主要缺点是重组效率比较低。 2) Ad-Easy法：原理是通过同源臂重组的方式在细菌中获得重组腺病毒基因组质粒。将克隆了外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分基因组的质粒共转化RecA+细菌，在细菌RecA重组酶的作用下经抗性筛选获得重组腺病毒基因组质粒，将其线性化后转染293细胞获得重组病毒。 3) AdMax包装系统：通过Cre/loxP获得重组病毒，这个过程发生在293细胞中，从而避免在细菌中重组。将克隆了外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分基因组的包装质粒共转染293细胞，利用Cre/loxP系统的作用实现重组，产生重组腺病毒。这个系统有多种优势，包括操作简便、重组效率高、获得的病毒产率高（一般大于10（4）vp/cell）、目的基因的表达水平高（因为mCMV启动子比hCMV启动子强若干倍）等。鉴于这些特点，本公司推荐用AdMax包装系统制备腺病毒载体。AdMax系列有多种，其中最常用的是AdMax kit D。

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