TMT™是一种多肽体外标记技术。该技术采用2种、6种或10种同位素的标签,特异性标记多肽的氨基基团,经过串联质谱LC-MS/MS分析,可同时比较2组,6组或最多10组不同样品中蛋白质的相对含量。
技术原理
TMT™标签由三部分组成:分子量报告基团、分子量标准化部分和反应基团,形成2种、6种或10种相对分子量相等的标签。
TMT™试剂通过反应基团能够高效地标记酶解后的肽段。在一级质谱图中,分子量标准化部分使任何一种TMT™试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中,报告基团优先断裂,释放报告离子。每个报告离子都有各自独特的分子量,并且能够在MS/MS分析中反应出所标记的多肽的样品丰度,根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息,再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。
技术流程
与iTRAQ技术的实验流程相比较,区别在于标记肽段时用的试剂不同
技术优势
1.高通量:能同时对10组样本中包含的蛋白进行鉴定及表达差异分析,可实现3样品3次重复的实验设计。2.适用范围广:可用于各种类型生物样本,样品类型包括:胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。3.灵敏度高:可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白。4.高效:液质连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。
应用领域
生物标志物筛选药物作用靶点研究蛋白混合物或重组蛋白混合物精确定量以上内容最终解释权归苏州普信生物医药科技有限公司所有