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人睾丸支持细胞
C57BL/6小鼠神经干细胞
组织样本处理
通过苏州工业园区市场监督管理局认证 
电荷异质体纯度CIEF分
亚基修饰分析
肽图一级结构确认分析
液相色谱杂质分析
蛋白质翻译后修饰分析
一级结构确认
纯化后蛋白质分子量测
纯化后蛋白质定量代谢组学主要是对特定条件下或某一时刻细胞内代谢物进行的分析, 因细胞内酶系活跃、代谢转换迅速, 取样和样品制备方法显著影响分析结果的准确性、重复性。因此, 做好样品的前处理是取得可靠分析结果的先决条件。根据研究对象、目的和分析技术的不同, 对样品的前处理要求也不一致, 不存在一种普适性的方法, 样品处理方法大致分为两步: 细胞淬灭和代谢物提取。
淬灭也称为“灭活”, 目的是让细胞内的酶失活, 保证代谢物的轮廓“冻结”。对于胞内代谢物, 由于采样或脱离培养环境后细胞内代谢状态的变化, 造成代谢物种类及含量也随之发生变化, 为了正确反映培养环境中细胞代谢物的真实信息, 需要立即淬灭细胞, 终止胞内反应。理想的淬灭技术应在保持细胞完整性的基础上确保酶迅速失活。淬灭 方法包括液氮冷冻法、酸碱灭活法、快速过滤法、低温离心法、细胞刮法等。采用低温离心法及细胞刮法淬灭多种贴壁哺乳细胞, 结果发现低温离心可引起细胞内大量代谢物的泄漏, 不适于代谢组学研究, 而细胞刮法较为理想。
研究发现, 淬灭过程会导致泄漏即细胞内代谢物的丢失, 且泄漏的程度与淬灭时间、温度及加入的淬灭试剂量等有关; 随着淬灭剂的加入、淬灭时间减少、离心速度加快, 泄漏程度会减轻。既然代谢物泄漏在所难免, 在进行样品前处理时应尽量将泄漏的影响降到最低, 并注意平行操作, 快速淬灭后, 迅速低温离心收集样品。另外, 由于受细胞种类或分析技术的影响, 不同淬灭方法效果可能存在差异, 在实际应用中应做全面考察, 选择最佳淬灭方法。
代谢物提取 一旦代谢反应通过灭活被停止, 代谢产物就需要从细胞中提取出来。根据细胞代谢组学研究层次不同, 提取方法及要求也不同。如在靶 标分析中, 需要采用特定的方法有选择性地提取出相应的组分; 而在轮廓分析中, 则需尽可能提取出多种代谢物。目前许多研究者以细胞能量代谢中间产 物的量为指标, 对多种提取方法进行了系统考察, 但因各细胞株种类、培养条件、培养基组成及细胞生理条件等不同, 造成代谢物水平差异较大, 至今仍没有统一的标准方法, 实际中应根据化合物及实验目的的不同选择相应的提取方法。一般提取时应遵循以 下原则: ① 以适当的回收率从细胞中提取最大量的代谢产物; ② 代谢物不应该遭遇任何理化修饰, 将降解控制在最小范围内; ③ 防止代谢物泄漏; ④ 具有非破坏性。
对细胞样本数量的要求
一般细胞量1.5*10^7及以上即可，细胞培养上清液200ul。
详情细胞收集方式可直接与我们工作人员联系。
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