产品说明
胆碱和它的代谢产物对细胞结构完整,细胞信号传递以及胆碱神经递质传递起着重要作用。异常的胆碱代谢与精神病如焦虑症相关。博世生物技术提供了用于生物样品胆碱浓度检测的简单,直接,高通量的方法。该检测中,胆碱被胆碱氧化酶氧化生成甜菜碱和能与特殊显色剂反应形成粉红色产物的H2O2。产物的吸光强度(570nm)或荧光强度(530/585nm)直接与样品中胆碱浓度成正比。
产品特点
只须20mL样品。线性检测范围:比色法1 - 100mM,荧光法 0.2 - 10mM 胆碱。
适用范围
直接检测:生物样品如血清、血浆、尿液、唾液、乳汁、组织和细胞培养物中的胆碱浓度。
药物开发/药理学:药物对胆碱代谢的影响。
试剂盒组成(96孔板供100份测试)
缓冲液: 10 mL 酶试剂:120 mL
显色剂:120 mL 标准液:400 mL 2 mM胆碱
贮藏条件:试剂盒应冷冻运输,所有试剂均于-20°C保存。保质期为3个月。
注意事项:本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。
比色法检测
样品准备: 液体样品如血清和血浆可直接检测。组织和细胞提取物则用预冷的1 x PBS 溶液匀浆并以14,000rpm的转速离心5分钟制备而成。取上清液用于检测。对于乳汁样品,用100mL 6N HCl 与600mL乳汁混合,以14,000rpm的转速离心5分钟。将300mL上清液移至一洁净离心管内,再用50mL 6N NaOH中和。将中和后的上清液用于检测(稀释系数n = 1.36)。
注意:(1)已知含巯基的试剂(如β-***,二硫苏糖醇> 5mM)可干扰这项检测,故应在样品准备过程中避免使用。(2)该检测是以动力学反应为基础。将工作试剂加入标准品和样品时动作应迅速,混匀应迅速而彻底。
1. 将所有试剂放置至室温。打开试管前先短暂离心。检测过程中将酶试剂管始终置于冰上。
2. 标准品:将12mL 2 mM标准液与228mL 蒸馏水dH2O混合(最终浓度为100mM)。用dH2O稀释标准品,比例如下:
No | 100 mM STD + H2O | Vol (mL) | Choline (mM) |
1 | 100 mL + 0 mL | 100 | 100 |
2 | 60 mL + 40 mL | 100 | 60 |
3 | 30 mL + 70 mL | 100 | 30 |
4 | 0 mL +100 mL | 100 | 0 |