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乙醇(化学法)测试盒

产品价格: ¥2751.00

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发货时限:
暂无
所在地区:
中国北京
有效期至:
长期有效
最后更新:
1970-01-01 08:00:00
浏览次数:
407

产品详情

品牌名称:
 

产品说明

含酒精的饮料属于日常饮用的饮料。研究表明,酗酒可能导致各种形式的肝脏疾病和促进死亡率的上升。定量测定酒精(乙醇,C2H5OH)浓度被广泛应用在基础研究,药物开发,临床研究和酒类制造业。简单,直接,自动化测量乙醇浓度方法是非常可取的。博世生物技术公司的乙醇测试盒是基于乙醇脱氢酶催化氧化乙醇,其中形成的NADH耦合到甲臜(MTT)发色体上。产物的颜色强度(565nm)与样品中乙醇的浓度成正比。

适用范围

直接检测:生物样品如血清、血浆、尿液、唾液中的酒精

药理学药物对酒精代谢的影响

产品特点

灵敏准确检测下限为0.0008 vol % (140 mM or 8 ppm),线性度高达0.1%酒精(96-孔板法)

使用方便:仅添加单一工作试剂,培养30分钟,不需加热器。

高通量筛选:通过96-孔板高通量的自动化检测,每天可以检测上千份样品

试剂盒组成(96孔板供100份测试)

   缓冲液:    10  mL          MTT 试剂:1.5 mL          

   酶试:   120 mL           终止试剂:  12 mL         

   NAD 试剂: 400 mL          标准液:1.5 mL 1% 乙醇

贮藏条件:室温下储存终止液,其他所有试剂均于-20°C保存。保质期为6个月。

注意事项:本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。

操作步骤

1. 标准曲线: 25 mL 1% 标准品加 225 mL蒸馏水制备0.1%的乙醇预混液(Premix),标准品稀释如下

No

Premix + H2O

Vol (mL)

Ethanol (%)

1

     100mL +     0mL

100

 0.10

2

       60mL +   40mL

100

 0.06

3

       30mL +   70mL

100

 0.03

4

         0mL + 100mL

100

            0.00

转移10 mL标准品到透明96-孔板的孔中。

样品:加10 mL样品至96孔板的孔中。注意:唾液样品应在测试前用PBS稀释10倍。

2反应:在移液前短暂离心酶试剂管,对每一个反应孔,按80 m缓冲液, 1 mL酶试剂, 2.5 mL NAD 14 mL MTT比例制备足量工作试剂。推荐现用现配。

向每个孔内快速添加90 mL工作试剂,轻敲孔板使其混合均匀。室温下培养30分钟。每孔添加100 mL终止试剂,轻敲孔板使其混合。

3. 读取565 nm (520-600nm) 处波长的光密度

4. 浓度计算:从标准品的测值中减去空白对照的测值( #4),绘制标准曲线(DOD vs 标准乙醇浓度)。测定斜率(Slope)并计算样品中乙醇的浓度,

ODSAMPLE  ODBLANK分别是样品和H2O空白对照的OD565nmn是样品稀释系数(对唾液样品 n = 10)

 注意: 如果样品酒精浓度高于0.1%,用蒸馏水稀释并再次检测。结果乘以稀释系数。

单位换算1 vol % 乙醇相当于 170 mM or 785 mg/dL 

实验必需品(未提供)

移液器、透明平底96孔板、吸光度分析仪。

总论

1. 该测试是基于酶动力学反应,加入工作试剂应迅速并要短暂混合。推荐使用多通道移液器。

2. 样品制备过程中应避免使用下列干扰物质:抗坏血酸,SDS (>0.2%),叠氮化钠,NP-40(>1%)Tween-20(>1%)

96孔板标准曲线

参考文献

1. Dembele, K. et al (2008). Effects of ethanol on pancreatic beta-cell death: interaction with glucose and fatty acids. Cell Biol Toxicol. 25(2):141-52.

2. Ou XM et al (2010). A novel role for glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and monoamine oxidase B cascade in ethanol-induced cellular damage. Biol Psychiatry 67(9):855-63.

3. Tapia H and Morano KA (2010). Hsp90 nuclear accumulation in quiescence is linked to chaperone function and spore development in yeast. Mol Biol Cell. 21(1):63-72.

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