杆状病毒(Baculoviruses)是一种高产量的真核基因表达载体,在昆虫细胞内,杆状病毒表达的外源基因产物可以得到各种翻译后修饰,包括***酸化、糖基化、酰胺化、信号肽切割、蛋白质的裂解等。用该表达系统比用原核表达系统更容易获得有正确结构和修饰的活性蛋白。赛尔生物的昆虫表达专家利用Invitrogen公司的Bac-to-Bac昆虫表达系统,有着在昆虫系统中成功表达一百多种蛋白的经验,能够以优惠的价格为客户提供最优质的服务。
客户提供 | 服务内容 | 参考报价 | 周期(天) |
基因信息 | 1:RT-PCR反应扩增目的基因 2:将目的基因亚克隆到pFastBacTM 质粒 3:将重组的含目的基因的pFastBacTM 质粒转化含有杆粒和辅助子的MAX EfficiencyR DH10Bac细胞 4:筛选并制备出含目的基因的重组杆粒DNA 5:转化昆虫细胞Sf9,制备出重组杆状病毒P1 6:再次感染昆虫细胞,扩增病毒,制备出重组杆状病毒P2 7:滴定并感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的表达 | ¥22,000 | 40-80 |
目的基因克隆 | 1:将目的基因亚克隆到pFastBacTM 质粒 2:将重组的含目的基因的pFastBacTM 质粒转化含有杆粒和辅助子的MAX EfficiencyR DH10Bac细胞 3:筛选并制备出含目的基因的重组杆粒DNA 4:转化昆虫细胞Sf9,制备出重组杆状病毒P1 5:再次感染昆虫细胞,扩增病毒,制备出重组杆状病毒P2 6:滴定并感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的表达 | ¥20,000 | 40-80 |
赛尔生物交付 | 1:构建好的含目的基因的pFastBacTM 质粒 2:含目的基因的重组杆粒DNA 3:1ml重组杆状病毒P2(滴度>107Pfu/ml) 4: SDS-PAGE结果检测目的蛋白的表达 5;20ml培养基表达量的表达蛋白 6: 简单实验流程及结果 | ||
注: | 1:本服务只包括客户目的蛋白昆虫表达系统的建立,和少量目的蛋白的表达(20ml培养基),不包括昆虫细胞目的蛋白的大量表达。 2: 对于一些客户提供的目的基因,可能存在对昆虫表达系统毒性太大而无法表达的情况。这种情况下我们仅收取50%的费用。我们仍然提供以下的结果: ü 构建好的含目的基因的pFastBacTM 质粒 ü 含目的基因的重组杆粒DNA ü 1ml重组杆状病毒P2(滴度>107Pfu/ml) 阳性对照基因的表达结果以证明我们的系统 |