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纳米磁珠法通用型生物总RNA提取试剂盒

产品价格: ¥790.00

最小起订量:暂无 可售数量:暂无

发货时限:
暂无
所在地区:
中国山东枣庄市
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-06-01 01:30:02
浏览次数:
425

产品详情

品牌名称:

 我们公司生产的国际领先的纳米磁珠及独特的试剂盒适用于从多种生物样品中快速提取总RNA。使用本试剂盒可以从少量(0.02-0.2g左右)样品中提取几到几十微克完整性好的总RNA, 提取到的RNA可用于northern, primer extension, RT-PCR,体外翻译,S1酶切图谱,第二代核酸测序,生物芯片等应用。提取过程中不需要抽真空或反复离心,节约您宝贵时间,耗材及经费。不用***酚、氯仿、异戊醇,免去您接触有毒、有害试剂。 温馨提示:RNA的得率与样品的类型、储存条件、储存时间长短等有很大关系。

以下符合RNA制备标准的试剂、器皿需操作者提前准备:

无水乙醇,分析纯异丙醇(IPA),β-***,DNaseI(optional)

1-1000ul移液枪及枪头,1.5 ml离心管,磁力分离,旋涡混合器,高速离心机,研磨棒

50-7oC 水浴;如发现GR11 试剂有浑浊,在37-70 oC水浴中加热几分钟溶解即可

 

第一次使用试剂盒需配制的溶液:

1. 15 毫升分析纯异丙醇到RWB11试剂瓶里,混均,并在瓶上打勾

2. 21 毫升无水乙醇到RWB22试剂瓶里,混均,并在瓶上打勾

 

1) Lysis Cell and Remove Protein/Polysaccharide请按 RNA 制备标准操作

  200ul 50oC 预热的 GR11  5ul*** 到 1.5ml 不含RNA 酶的离心管 

   称取 20-200mg 生物材料,快速放到上步离心管,用玻璃棒在离心管内挤压充分研磨(关系到RNA得率)

    400ul 50oC 预热的 GR11 到上步 1.5ml离心管(干材料需多加 1/3V GR11)

    50-70oC, 5-20 min (裂解时间取决于所用材料)

 

 加 120 ul GR22, 120 ul 无水乙醇,混匀,室温 5-10分钟

    13k rpm, 3分钟 

 

2) Bind RNA to RNA Nano Beads(RNB)

 约 650 ul上清液到新的不含RNA 酶的 1.5ml 离心管中 [不要取到下面的沉淀]

 一倍体积 650 ul 的 IPA 上步的离心管

  30ul 刚混匀的 RNB 磁珠上步的离心管,混,室温 5-10 min, 

    把上步的离心管放到磁力分离上 3-5min, 弃干净上清

 

3) Purify RNA

  500 ul RWB11 到上步的离心管, 混

    放到磁力分离1-3 min, 弃干净上清

 

  500 ul RWB22 到上步的离心管,混均

    放到磁力分离上,1-3 min, 弃干净上清

 

 风干 1-3 min

 

4) Release RNA

  200 (50-200) ul REB 到上步的离心管, 混

       室温 5-10 min, 混

       放到磁力分离器上,3-5分钟

 把上清液转到没有 RNase 的干净离心管里,注意不要取到磁珠

 

 如果需要做DNA 消化,可直接到下一步 5)Remove DNA。否则可在此步测试RNA 样品。

5) RemovDNA (optional)

  DNaseI 的用量取决于DNA含量及DNase 的活性,可参照下述方法去除 DNA。

 

在不含 RNA酶的离心管中加入以下试剂:

 

 

匀, 室温 10 min 

70oC,5 min 

 

每个胶孔加 2-5ul RNA 溶液 跑 1.5% 胶检测核酸;RNA 保存在-20 oC 或 -8oC

 

DNase 酶处理后的 RNA 可用于 RT-PCR, real time PCR 等 对DNA敏感的 RNA分子生物学应用。

 

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