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我们公司利用国际领先技术生产的纳米磁珠试剂盒适用于从植物细胞中快速提取基因组DNA。采用独特的试剂系统配合纳米磁珠可以从少量(0.02-0.1g左右)样品中提取几到几十微克的基因组DNA。提取到的DNA可用于多次的PCR反应模板,测序等分子生物学应用,节约您宝贵时间,免去您接触有毒试剂的危险。 温馨提示:DNA的得率与样品的类型、储存条件、储存时间长短等有很大关系。以下试剂、器皿需操作者提前准备:无水乙醇,分析纯异丙醇(IPA),β-***, RNaseA1-1000ul移液枪及枪头, 1.5 ml离心管,磁力分离架,旋涡混合器,高速离心机,研磨棒如发现PD11 试剂有些浑浊,在37-70 oC水浴中加热几分钟溶解即可第一次使用需准备的溶液:1.加15 毫升分析纯异丙醇到WB11试剂瓶里,混合均,并在瓶盖上打勾2.加21 毫升无水乙醇到WB22试剂瓶里,混合均,并在瓶盖上打勾 1) Lysis Cell and Remove Protein 取 200ul 50oC 预热的 PD 11,5ul***,20-200mg 植物组织到 1.5ml 无菌离心管,充分研磨(关系到DNA得率) 加 400ul 50oC 预热的 PD 11,2ul 25mg/ml RNaseA(optional)到上步 1.5ml 离心管,充分混匀 50-70oC 5 min x2 (裂解时间 5-20min 取决于材料本身) 加 150 ul PD 22,150ul 无水乙醇,混匀,室温 5-10分钟 13k rpm,3分钟 2) Bind DNA to Nano Beads(NB) 取约 700 ul上清液体到新的 1.5ml 离心管中 (不要取到下面的碎片) 加一倍体积 700 ul IPA, 30ul 刚混匀的 NB 磁珠 到上步的离心管,混匀 室温 5-10 min,混匀 把上步的离心管放到磁力分离架上 3-5min,弃上清3) Purify DNA 加 500 ul WB11 到上步的离心管, 混匀 放到磁力分离架上,1-3 min,弃上清 加 500 ul WB22 到上步的离心管,混匀 放到磁力分离架上,1-3 min,弃上清 风干 1-3 min4) Release DNA 加 50-200 ul EB (Elution buffer) 到上步的离心管,混匀 室温 5-10 min, 混匀 放到磁力分离架上,3-5分钟 把上清液转到没有 DNase 的干净离心管里,注意不要取到磁珠 测试 DNA样品吸光度,每个胶孔加 3-10ul DNA溶液 跑 0.7% 胶,DNA 保存在-20oC 或 -80oC
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