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环磷酸腺苷放免试剂盒

产品价格: ¥1200.00

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所在地区:
中国上海
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长期有效
最后更新:
2019-06-11 16:44:11
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32

产品详情

品牌名称:
EB
货号: xY-10153
英文名: cAMP kit
                                环磷酸腺苷放免试剂盒操作说明书
CAMP(HY-10153) RIA KIT
一、         药物供应试验
     1.BSA 1瓶(用于配制0.2%BSA的醋酸缓冲液):溶于 15  毫升50mM PH 4.75
的醋酸缓冲液(配法见后)
2.乙酰化剂试剂:使用前将三乙胺和醋酐混匀即可(三乙胺和醋酐各一瓶)
3.125I- CAMP1瓶:使用时用50 mM醋酸缓冲液 10 毫升稀释标记品(约2万CPM左右/0.1ml).
4. CAMP标准1瓶:取 100  微升,用 2.6  毫升50 mM醋酸缓冲液稀释为2pmol/0.1ml,然后倍比稀释成8个浓度点:1、0.5、0.25、0.125、0.062、0.031、0.016、0.008pmol/0.1ml
(B1~B8)。
5. CAMP抗血清一瓶:使用时用含0.2%BSA的醋酸缓冲液13 毫升溶解
6.羊抗兔IgG血清1瓶,每瓶用 10 ml生理盐水溶解即可,4℃保存。
7.正常兔血清1ml,用 10 ml生理盐水溶解即可4℃保存。
8、EDTA抗凝剂1瓶。
9、醋酸缓冲液1瓶: 1:4稀释(1份该液加3份蒸馏水)。
环磷酸腺苷放免试剂盒二、操   作
                          CAMP  RIA 加液程序    (单位: ul )
           ————————————————————————————
              试   剂      T     NSB      B0     S1~S8      样  品
           ————————————————————————————
              醋醋缓冲液  ——    200      100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——     100       ——
              样        品    ——    ——    ——    ——       100
              乙酰化试剂  ——      5          5       5         5
              抗  血  清    ——    ——     100     100       100
             125I-CAMP  100     100      100     100       100
           ————————————————————————————
                                  充分混匀,4℃   过夜。
           ————————————————————————————
              正常兔血清   100     100      100     100      100
              羊抗兔IgG    100     100      100     100      100
              ————————————————————————————
                                  充分混匀,4℃   过夜。
              ————————————————————————————
  摇匀,室温放置2~3h, 3000rpm离心15分钟,吸去上清,在γ计数器上测定沉淀CPM数。
 
环磷酸腺苷放免试剂盒三、计算
      NSB为非特异结合管,标准曲线及样本测得值均需减去NSB值,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由γ计数器预先编制得程序,直接给出有关参数、标准曲线及样品浓度。或从EXEL表格中的直线回归方法计算。所得结果乘以稀释倍数即可。
 
四、样品收集
 
1、需配试剂
1)  EDTA抗凝剂。取9.3克EDTA二钠盐加入1mol/L   NaOH溶液25ml,溶解后加水到50ml.。
2)  50mMPH4.75醋酸缓冲液,(含4mM EDTA):取27.22克NaAc . 3H20溶于1000ml蒸馏水,即为0.2M  NaAc,用冰醋酸配制0.2M醋酸,然后取410毫升0.2M HAC和590毫升0.2M NaAc混匀,测PH值调到PH 4.75,然后每1000毫升溶液加入5.95克 EDTA 二钠盐溶解即可.此溶液为200 Mm  pH 4.75 的醋酸缓冲液,EDTA为16mM。使用时将该液1:4稀释。(1份该液加3份蒸馏水)即成50mM  pH4.75醋酸缓冲液,含EDTA 4Mm.
环磷酸腺苷放免试剂盒2、血样本处理
1)  取静脉血1~2ml,注入含DETA抗凝剂50ul的试管中,摇匀,一小时内离心4℃,2000rpm离心10min,分离血浆, —20℃保存,严禁反复冻融。
2)  血浆处理:取0.1ml血浆加入2ml无水乙醇,振摇1分钟,静置5分钟,3000转/分离心10分钟。将上清液到入指形管或青霉素小瓶,残渣再加入75%乙醇1ml,匀浆,3000rpm离心10分钟。合并上清液,于60℃烤箱中吹干,残渣放于4℃保存。测量时用1ml醋酸缓冲液溶解,然后取0.1ml测量,此时稀释倍数为100。结果×100即为pmol/ml.
 
3、组织样品处理
取组织50毫克左右放入盛有2ml冷的50mM  PH4.75醋酸缓冲液的试管内(冰浴),匀浆,加入2ml无水乙醇,混匀,静止5分钟,3500转离心15分钟,将上清液收集在青霉素小瓶内,再用75%乙醇2ml洗沉淀,匀浆分散,混匀,3500转离心15分钟。合并上清液,60℃烤箱中吹干,残渣放于4℃保存。测量时用1ml醋酸缓冲液溶解,然后取0.1ml测量。
  4、对于血、组织样本,不同血样或组织中的CAMP或CGMP含量不同,测试前最好预实验确定样品稀释度。
 
五、正常人血浆参考值:
CAMP:23.1±7.7pmol/ml
xy-E11224 人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因 ELISA试剂盒 People like RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA kit
xy-E11225 人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA试剂盒 People like RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA kit
xy-E11226 人ras同源物基因家族成员b(RHOB)ELISA试剂盒 Human ras homolog gene family members b (RHOB) ELISA kit
xy-E11227 人假定蛋白LOC677340 ELISA试剂盒 Human hypothetical protein LOC677340 ELISA kit
xy-E11228 人假定蛋白LOC433328 ELISA试剂盒 Human hypothetical protein LOC433328 ELISA kit
xy-E11229 人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)ELISA试剂盒 Human myeloid differentiation primary response gene factor 88 (MYD88) ELISA kit
xy-E11230 人干扰素活化基因205(Ifi205)ELISA试剂盒 Activation of human interferon gene 205 (Ifi205) ELISA Kit
xy-E11231 人组织相容性2-K1-K 区(H2-K1)ELISA试剂盒 Histocompatibility 2-K1-K region (H2-K1) ELISA kit
xy-E11232 人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒 Human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4 (LILRB4) ELISA kit
xy-E11233 人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA试剂盒 Human C -type lectin domain family 4 member E (CLEC4E) ELISA kit
xy-E11234 人假定蛋白LOC677168 ELISA试剂盒 Human hypothetical protein LOC677168 ELISA kit
xy-E11235 人淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA试剂盒 Human lymphocyte antigen 6 complex locus A (Ly6a) ELISA kit
xy-E11236 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)ELISA试剂盒 Human eosinophils RNA enzyme hydrolysis related family member 1 (EAR1) ELISA kit
xy-E11237 人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)ELISA试剂盒 Human hybrid series of protein kinase -like domain (MLKL) ELISA kit
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xy-E11239 人类似cDNA顺序BC027382 ELISA试剂盒 People like cDNA sequence BC027382 ELISA kit
xy-E11240 人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA试剂盒 People like RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA kit
xy-E11241 人REST协阻抑因子3(RCOR3)ELISA试剂盒 Who co- repressor REST factor 3 (RCOR3) ELISA kit
xy-E11242 人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)ELISA试剂盒 One set of protein subfamily members 11 (COLEC11) ELISA kit
xy-E11243 人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA试剂盒 Α1β human glycoprotein (α1β-GP) ELISA Kit
xy-E11244 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)ELISA试剂盒 Human soluble triggering receptor expressed on myeloid cells -1 (sTREM-1) ELISA Kit
 
温馨提示:不可用于临床治疗。

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