货号: | XY-1010 |
供应商: | 上海信裕 |
数量: | 大量 |
英文名: | Super ECL Plus Deteckit |
保质期: | 6个月 |
Western Blot ECL超敏发光液产品标准:荧光ECL检测试剂(A液25ml、B液25ml)
产品应用:免疫印记试验
产品介绍:
SuperECL Plus Western Blot超敏发光液
Western Blot超敏荧光发光试剂用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。由于采用了独特的发光底物系统,SuperECL Plus Western Blot超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光ECL检测试剂。(A液25ml、B液25ml)
极高灵敏度和高信噪比,检测10-100 fg抗原;
可在日光灯下进行发光操作;
节省抗体(1:2000-1:10000)
使用方法
1.执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意第二抗体用HRP标记的lgG, 或者用一抗抗体-链亲和素-生物素-HRP夹心方法。
2.Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液A和B,放入干净容器中混合。工作液室温放置数小时灵敏度略有降低但仍可使用。
3.用镊子取出Western Blot膜,沥干洗膜缓冲液。将膜完全浸入发光工作液(0.125ml发光工作液/cm2膜)中,与发光工作液充分接触。室温孵育3分钟。延长孵育时间并无必要,过长的孵育时间甚至会降低灵敏度。
4.用镊子夹起膜,沥干发光工作液。
5.打开X光胶片暗盒,在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜,去除皱褶。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将Western Blot膜固定在暗盒内,蛋白带面向上。
6.暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
储存条件:4 oC密封避光保存一年以上。
安全性: 无特殊毒性,按普通化学品处理。
Western Blot ECL超敏发光液 注意事项:
1.允许步骤2-5在日光灯下进行方便操作;但在强光下操作时间拖得太长,灵敏度可能会有一定程度降低,移到暗房操作可避免之。
2.戴手套可以避免在膜上留下手印。
3.长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。
4.与工作液孵育1-5分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带可能发光较弱,但仍可成功进行X光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。荧光可持续10小时以上,条带弱时可延长曝光至1-10个小时。
5.由于超敏发光液及其灵敏,对大多数来源的进口抗体我们强烈推荐抗体的起始浓度为一抗1:1000,二抗1:2000。通常为一抗1:2000二抗1:4000或更加稀释。 抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败!
6.某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
7.使用预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标 签可精确确定条带位置和大小。
试验问题解答:
使用时连对照都无法显示
问题解答:
实验时注意以下问题:① 夏天天气炎热,显-定影系统必须现用现配,用完后及时更换。② 发光液在炎热的天气不要在室温搁置太久。 ③ 试剂中的A、 B液必须用时才混合,不要放置一段时间才用。④ 膜洗完后应沥干全部水分后再进行显-定影,不要带很多水
xyA953Hu 【中文名称】:人信号调节蛋白α(SIRPα)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Alpha (SIRPa) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA947Hu 【中文名称】:人信号调节蛋白γ(SIRPγ)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Gamma (SIRPg) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA561Hu 【中文名称】:人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor ReHZptor (LIFR) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyG790Hu 【中文名称】:人Mdm2 p53结合蛋白同源物(MDM2)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Mdm2 p53 Binding Protein Homolog (MDM2) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyK111Hu 【中文名称】:人DNA修复蛋白RAD50(RAD50)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for DNA Repair Protein RAD50 (RAD50) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyB405Hu 【中文名称】:人补体成分1q受体(C1qR1)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Complement Component 1, Q ReHZptor (C1qR1) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyG480Hu 【中文名称】:人毛透明蛋白(TCHH)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Trichohyalin (TCHH) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyK505Hu 【中文名称】:人抗肝素/血小板因子4抗体(Anti-HPF4)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Anti-Heparin/Platelet Factor 4 Antibodies (Anti-HPF4) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyB324Hu 【中文名称】:人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Caldesmon (CALD) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyC223Hu 【中文名称】:人辅肌动蛋白α4(ACTN4)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyG084Hu 【中文名称】:人嘌呤能受体P2Y14(P2RY14)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Purinergic ReHZptor P2Y, G Protein Coupled 14 (P2RY14) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyG120Hu 【中文名称】:人Synerginγ蛋白(SYNRγ)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Synergin Gamma (SYNRg) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyG711Hu 【中文名称】:人G蛋白偶联受体109B(GPR109B)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for G Protein Coupled ReHZptor 109B (GPR109B) 【灵敏度】:9.375pg/mL
Western Blot ECL超敏发光液