WIP组织细胞裂解液

WIP组织细胞裂解液产品标准：国际通用标准

产品应用：用于组织细胞裂解

产品介绍：

         一.WIP组织细胞裂解液使用说明书        二.使用方法说明
         一. WIP组织细胞裂解液使用说明书
    产品简介
    WIP组织细胞裂解液(Tissue and Cell lysis solution for Western Blot and Immunoprecipitation )，是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本产品裂解细胞获得的裂解产物，可用于PAGE，蛋白印迹（Western Blot），免疫沉淀(immnolprecipitation，IP),免疫共沉淀(co-IP) 和蛋白与多肽的分离纯化。
    WIP裂解液的主要成分为Tris(pH 7.5，20mM)，150mM NaCl，去垢剂Triton X-100以及多种蛋白酶抑制剂,无需自备PMSF、磷酸酶抑制剂等蛋白酶抑制剂。WIP不仅可以用于细胞培养物的裂解，也可直接用于大多数动物组织的裂解。在有效地裂解组织和细胞的同时，可强烈地抑制蛋白、多肽的降解，并保持原有的分子结构和蛋白间相互作用。
    用WIP裂解得到的组织细胞蛋白样品，可以用博奥森生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford试剂盒测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
        包装清单
        WIP组织细胞裂解液        30ml
        PMSF（100X）             0.3ml
        保存条件：
        -20℃保存，一年有效。 
       WIP组织细胞裂解液 注意事项：
        1．为获得最佳的实验效果，可适当分装使用，以尽量避免反复冻融。
        2．PMSF应现用现加。
        3．裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
        4．蛋白酶抑制剂均有较高的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦直接接触，请立即用流水冲洗，再向医疗保健结构咨询。

        二.使用方法说明
    1．培养细胞
    取出WIP裂解液，待融化后，颠倒混匀数次，适量分装冻存。在使用前取出，按比例加入PMSF（使其最终浓度为1mM），混匀，立即使用。
    贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰，也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入WIP。用枪吹打数下，使WIP和细胞充分接触。通常WIP接触细胞数秒后细胞就会被裂解。
    悬浮细胞，收集培养细胞，离心去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰，也可以不洗)，用手指把细胞用力弹散，按6孔板每孔细胞加入100-200微升的比例加入WIP。如果细胞数量较大，应按50-100万细胞/管分装或根据细胞数量按比例增加WIP。用手指轻弹管底以促进WIP和细胞充分接触，裂解完全时应无明显的细胞颗粒。
    裂解物经10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
    裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
    2．组织样品
    取Ep管，分别称重标记，把组织剪切成小块装入Ep管中，称重。按每20毫克组织加100-200微升的比例加入WIP(如裂解不完全，可以适当增加WIP的用量；如需要的蛋白样品浓度较高，可以适当减少WIP的用量)。用手握式电动组织细胞匀浆器匀浆约1分钟或直至充分裂解。10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
    如果组织样品本身非常细小，如淋巴细胞，可直接加入WIP裂解，通过振荡（Vortex）以使样品裂解完全
xyH122Hu    【中文名称】：人前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Six Transmembrane Epithelial Antigen Of The Prostate 2 (STEAP2)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyJ244Hu    【中文名称】：人DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyC429Hu    【中文名称】：人死亡关联蛋白激酶1(DAPK1)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 1 (DAPK1)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyE072Hu    【中文名称】：人原钙黏素β16(PCDHβ16)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Protocadherin Beta 16 (PCDHb16)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyC984Hu    【中文名称】：人多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PARP4)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyH777Hu    【中文名称】：人中间α-球蛋白抑制因子H3(ITIH3)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H3 (ITIH3)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyJ337Hu    【中文名称】：人软骨关联蛋白(CRTAP)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Cartilage Associated Protein (CRTAP)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyF862Hu    【中文名称】：人扭转原肠胚形成同源物1(TWSG1)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Twisted Gastrulation Protein Homolog 1 (TWSG1)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyC241Hu    【中文名称】：人端粒酶逆转录酶(TERT)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Telomerase Reverse Transcriptase (TERT)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyJ548Hu    【中文名称】：人BMP结合内皮调节因子(BMPER)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for BMP Binding Endothelial Regulator (BMPER)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyC359Hu    【中文名称】：人钙磷蛋白(CAPS)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Calcyphosine (CAPS)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyC445Hu    【中文名称】：人奇异不良素(DYSF)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Dysferlin (DYSF)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyE867Hu    【中文名称】：人补体成分1q子成分样蛋白1(C1qL1)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent Like Protein 1 (C1qL1)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyE869Hu    【中文名称】：人补体成分1q子成分C(C1qC)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC)     【灵敏度】：9.375pg/mL
xyF913Hu    【中文名称】：人斯钙素2(STC2)ELISA试剂盒    【英文名称】：ELISA Kit for Stanniocalcin 2 (STC2)     【灵敏度】：9.375pg/mL
WIP组织细胞裂解液